规格 磁珠法血液基因组DNA提取试剂盒（预封装48T） G3693-48T 48T 产品简介 本产品为48T规格预分装板，利用Servicebio Y-16 、 Y-48 全自动核酸提取仪以及自主研发的超顺磁性磁珠，在特别优化的缓冲条件下可高效、自动地从血液中纯化基因组DNA。本产品被设计用于最多同时进行48个样本的基因组DNA提取，整个过程在1小时内完成，可替代当前耗时、繁琐的乙醇沉淀步骤以及多次的漂洗步骤，极大的节省人工操作时间。提取的基因组DNA可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。 储存与运输 Proteinase K，RNase A冰袋（wet ice）运输，-20℃保存；其他试剂室温运输，室温储存；有效期12个月。 组成 Component Number Component G 3693 - 48 T G3693-1 10×Red Cell Lysis Buffer 30 mL G3693-2 Buffer GA 12 mL G3693-3 Proteinase K 1 mL×2 G3693-4 RNase A 200 μL G3693-5 Buffer GB 12 mL G3693-6 96孔预封装板 3块 G3693-7 8孔磁棒套 6条 说明书 1份 使用前须知（请仔细阅读） 1. 检查预封装板是否漏液，如果出现此类现象，请勿使用。 2. 使用前观察磁珠或试剂是否粘在封口膜或试剂预分装板孔壁上，如有此现象可上下混匀后短暂离心或于桌面上轻轻敲击试剂预分装板底部至液滴掉落后再使用。 3. Buffer GA如有沉淀现象，请于65℃加热溶解，待恢复至室温后使用。 4. 如果使用10×Red Cell Lysis Buffer，请提前计算需要用量，将10×Red Cell Lysis Buffer稀释为1×Red Cell Lysis Buffer后使用。 操作步骤 1. 样本裂解： a. 取50 µL-1 mL无核红细胞全血 （含抗凝剂） 于离心管中，加入5倍血液样本体积的1×Red Cell Lysis Buffer，颠倒混匀，室温放置5 min，期间颠倒混匀2-3次，4℃，3,000 rpm，离心10 min，使用移液器轻轻吸弃上清，请勿吸取沉淀 （如果血液样本 是冻存样本 ， 使用1× Red C ell Lysis Buffer 重复 操作 ，直到 沉淀 变成白色； 如果一些红细胞或细胞碎片与白细胞颗粒一起仍然可见，加入2倍体积的 1×Red C ell Lysis Buffer 重悬白细胞，室温孵育5 min后，4℃， 3,000 rpm， 室温 离心 10 min，将上清完全去除 ） ，加入200 μL Buffer GA，使用移液器吹打混匀。 b. 有核红细胞全血 （含抗凝剂） 勿超过10 µL，置于1.5 mL离心管中，补加Buffer GA至200 μL，使用移液器吹打混匀。。 2. 加入40 μL Proteinase K和4 μL RNase A，65℃孵育10 min （每 5 min混匀一次，可加速 细胞 裂解） ； 3. 向离心管中加入200 μL Buffer GB，颠倒混匀，70℃放置10 min，12,000 rpm离心1 min； 4. 预封装板准备：取出深孔板，孔板离心机500 rpm离心1 min或于桌面上轻轻敲击试剂预分装板底部至液滴掉落后再小心撕去铝箔封口膜； 5. 将第3步上清全部转移至预封装板的第1列和第7列孔位； 6. 将预封装板置于核酸提取仪相应的板位上； 7. Servicebio Y-16 、 Y-48 全自动核酸提取仪参数设置： 步骤 1 2 3 4 5 6 7 工位 3 1 2 3 4 5 3 等待时间 00:00:00 00:00:00 00:00:00 00:00:00 00:00:00 00:03:00 00:00:00 混合模式 a 2 2 2 2 2 2 2 混合时间 00:00:10 00:05:00 00:01:00 00:01:00 00:01:00 00:05:00 00:00:10 是否暂停 Ⓧ Ⓧ Ⓧ Ⓧ Ⓧ Ⓧ Ⓧ 吸磁时间 a 00:00:30 00:00:30 00:00:30 00:00:30 00:00:30 00:01:00 00:00:00 体积（µL） 600 600 500 600 600 50 600 温度（℃） --- 25.0℃ --- --- --- 25.0℃ --- a：如果不使用Servicebio Y-16 、 Y-48 全自动核酸提取仪，可根据其他适配本产品的仪器说明书调整吸磁时间和混合模式参数。 8. 安装磁套，运行程序； 9. 自动化提取步骤完成后，将第5列和第11列孔位中的核酸溶液小心转移至新的Nuclease-free离心管中，并于-20℃长期保存。 注意事项 1. 操作之前，请务必认真阅读本产品说明书。 2. 请勿将预装板倒置。 3. 应尽量使用新鲜全血，避免反复冻融，以确保提取的基因组DNA的收量及完整性。 4. 已加入抗凝剂的血液样品可在2-8℃短期保存最多一周，对于某些实验，例如Southern杂交等，需要得到完整全长的基因组DNA，将血液样品在2-8℃保存请不要超过3天；已加入抗凝剂的血液长期保存，请置于-70℃保存，血液样品应尽量避免反复冻融。 5. 请勿长时间干燥磁珠，以免影响DNA洗脱效率。 6. 实验时穿实验服，戴一次性手套，佩戴口罩，避免讲话，使用Nuclease-free的吸头和离心管避免交叉污染。 产品仅供科研用途，不用于临床诊断！ （产品包装升级中，以实物为准。 ）