全国400热线:4008-2525-86

实验类型
细胞
硬组织病理
代谢组学/蛋白组学
PCR/核酸电泳
普通组织病理
qPCR
WB
动物
组化/荧光/原位杂交
原位杂交
免疫荧光
免疫组化
DMPK
分子克隆
超微病理
生化/ELISA

原位杂交

实验介绍
货号名称规格价格操作
YDP1072原位杂交(DAB)240
YDP1073原位杂交(BCIP/NBT)240
YDP1074原位杂交(FISH单标)240
YDP1075原位杂交(FISH、IF双染)300
YDP1076原位杂交(FISH双标)300
YDP1077原位杂交(FISH三标)350
YDP1078原位杂交(组织芯片)500
YDP1096原位杂交(FISH、IF、IF三染)350
YDP1097原位杂交(FISH、FISH、IF三染)350

原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。

取材固定
货号名称规格价格操作
Y1121-500ML原位杂交固定液(植物)500 mL100
Y1123-500ML原位杂交固定液(较嫩植物)500 mL100
Y1124-500ML原位杂交固定液(动物)500 mL100

动物组织:组织取出PBS漂洗后立即放入原位杂交固定液(动物)(G1113-500ML)中固定12h以上,4°保存运输

植物组织:将植物组织取下后用水冲洗干净,然后放入原位杂交固定液(植物)(G1110-500ML)中,较大的组织需要切成小块再固定。一般在原位杂交固定液(植物)中固定24 h以上。较小或者幼嫩组织可根据材料大小适当减少时间。如有条件,样本浸没在固定液中,再通过抽真空作用可以促进样本的固定。

包埋切片
货号名称规格价格操作
YP1012组织石蜡包埋10
YP1021石蜡切片5
YP1136石蜡封片2
YP1018OCT包埋10

石蜡切片和冰冻切片都可以进行原位实验,具体选择可以根据样本情况进行选择,大部分情况可以优先选择石蜡切片,植物样本推荐选择石蜡切片,如需要看组织外源打入的自发荧光的情况,可以选择新鲜组织冰冻切片。


样本预处理,修复消化
货号名称规格价格操作
Y3056-30ML杂交液(10%甲酰胺)30 mL100
Y3062-30ML杂交液(15%甲酰胺)30 mL100
Y3057-30ML杂交液(20%甲酰胺)30 mL100
Y3058-30ML杂交液(30%甲酰胺)30 mL100
Y3081-30ML杂交液(35%甲酰胺)30 mL100
Y3059-30ML杂交液(40%甲酰胺)30 mL100
Y3060-30ML杂交液(50%甲酰胺)30 mL100

脱蜡与复水:对于石蜡包埋的组织切片,需要进行脱蜡和梯度复水处理,以去除切片上的石蜡并使组织恢复水分。

蛋白酶消化:使用蛋白酶 K对组织切片进行处理,使被遮蔽的靶核酸暴露出来,增加探针对靶核酸的可及性。

预杂交:在杂交前,使用不含探针的杂交缓冲液在杂交温度下孵育样品,以阻断玻片和标本中可能与探针产生非特异性结合的位点,降低背景信号。

探针制备
货号名称规格价格操作
YDP1098SweAMI ISH探针合成40 T1600
YDP1081探针设计合成-2OD(一端标记、DIG)条/2 OD1000
YDP1089探针设计合成-2OD(两端标记、DIG)条/2 OD1690
YDP1082探针设计合成-2OD(一端标记、FAM)条/2 OD800
YDP1090探针设计合成-2OD(两端标记、 FAM)条/2 OD1400
YDP1083探针设计合成-4OD(一端标记、FAM)条/4 OD1100
YDP1091探针设计合成-4OD(两端标记、FAM)条/4 OD1990
YDP1084探针设计合成-2OD(一端标记、CY3)条/2 OD1400
YDP1092探针设计合成-2OD(两端标记、CY3)条/2 OD2500
YDP1085探针设计合成-4OD(一端标记、CY3)条/4 OD1900
YDP1093探针设计合成-4OD(两端标记、CY3)条/4 OD3300
YDP1086探针设计合成-2OD(一端标记、CY5)条/2 OD1400
YDP1094探针设计合成-2OD(两端标记、CY5)条/2 OD2500
YDP1087探针设计合成-4OD(一端标记、CY5)条/4 OD1900
YDP1095探针设计合成-4OD(两端标记、CY5)条/4 OD3300

设计探针:根据目标核酸序列设计探针,确保探针与目标序列具有高度的互补性。

合成探针:通过化学方法合成标记有放射性同位素、荧光染料或其他标记物的探针。

重点产品介绍:

SweAMI ISH(GDP1087)采用SweAMI原位信号放大技术,通过DNA序列重复和DNA分支结构,使得靶标处可以结合大量的信号探针,相比于传统探针直标原位杂交方法有极大优势:

1.该方法理论上实现约4000倍信号放大。使用此方法可以增强信号、提高信噪比,特异性的检测目标靶核酸。背景低,结果可靠。

2.SweAMI探针为多序列混合探针,能进一步提高杂交结合效率。

3.可以做DAB,NBT,AEC,荧光单标,双标,三标,四标。

4.探针合成周期较短,最短2天即可合好,通过流程优化,可以缩短整个实验周期。

靶探针杂交

将制备好的探针与组织或细胞样品进行杂交。杂交条件需要优化,以确保探针与靶序列的有效结合;

倾去预杂交液,滴加含探针杂交液, 恒温箱杂交过夜。

杂交后洗涤
货号名称规格价格操作
Y3026-100ML20×SSC缓冲液100 mL30

杂交后需要进行一系列的洗涤步骤,以去除未结合的探针。洗去杂交液,2×SSC,40°C 洗10min,1×SSC,40°C洗2×5min,0.5×SSC室温洗10min。

显色

加入相应的显色底物,从而显示出杂交信号。

DAB显色:切片稍甩干后,在圈内滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下控制显色时间,阳性为棕黄色,纯水冲洗切片终止显色

BCIP/NBT显色剂显色:滴加BCIP/NBT显色液,显微镜观察阳性,阳性表达为蓝色,蓝紫色后纯水冲洗

常见问题

1. FISH+IF 共染实验,FISH 实验中用的蛋白酶K会消化蛋白抗原,影响I的阳性表达,可以分开进行实验

2. 植物组织存在很强的自发荧光,严重影响阳性判断,可以选择做白光原位杂交代替荧光原位杂交。


广州一科生物科技有限公司
广州一科生物科技有限公司
电话:4008-2525-86
020-28936965
020-83625189
邮箱:weikexie@163.com
地址:广州市白云区白灰场南路润祥大厦B栋707
粤ICP备19145173号-1版权所有 All rights reserved 广州市一科生物科技有限公司
本公司产品仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
  • 我的收藏
  • 咨询客服

    请填写您的信息,我们会尽快安排对应人员与您联系!

    单位名称:
    您的姓名:
    联系电话:
    咨询内容:
  • 联系电话

    客服电话:

    4008-2525-86

    020-28936965

    020-83625189

  • 返回顶部