原位杂交
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| YDP1072 | 原位杂交(DAB) | 张 | 240 | |
| YDP1073 | 原位杂交(BCIP/NBT) | 张 | 240 | |
| YDP1074 | 原位杂交(FISH单标) | 张 | 240 | |
| YDP1075 | 原位杂交(FISH、IF双染) | 张 | 300 | |
| YDP1076 | 原位杂交(FISH双标) | 张 | 300 | |
| YDP1077 | 原位杂交(FISH三标) | 张 | 350 | |
| YDP1078 | 原位杂交(组织芯片) | 张 | 500 | |
| YDP1096 | 原位杂交(FISH、IF、IF三染) | 张 | 350 | |
| YDP1097 | 原位杂交(FISH、FISH、IF三染) | 张 | 350 |
原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| Y1121-500ML | 原位杂交固定液(植物) | 500 mL | 100 | |
| Y1123-500ML | 原位杂交固定液(较嫩植物) | 500 mL | 100 | |
| Y1124-500ML | 原位杂交固定液(动物) | 500 mL | 100 |
动物组织:组织取出PBS漂洗后立即放入原位杂交固定液(动物)(G1113-500ML)中固定12h以上,4°保存运输
植物组织:将植物组织取下后用水冲洗干净,然后放入原位杂交固定液(植物)(G1110-500ML)中,较大的组织需要切成小块再固定。一般在原位杂交固定液(植物)中固定24 h以上。较小或者幼嫩组织可根据材料大小适当减少时间。如有条件,样本浸没在固定液中,再通过抽真空作用可以促进样本的固定。
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| YP1012 | 组织石蜡包埋 | 样 | 10 | |
| YP1021 | 石蜡切片 | 张 | 5 | |
| YP1136 | 石蜡封片 | 张 | 2 | |
| YP1018 | OCT包埋 | 样 | 10 |
石蜡切片和冰冻切片都可以进行原位实验,具体选择可以根据样本情况进行选择,大部分情况可以优先选择石蜡切片,植物样本推荐选择石蜡切片,如需要看组织外源打入的自发荧光的情况,可以选择新鲜组织冰冻切片。



| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| Y3056-30ML | 杂交液(10%甲酰胺) | 30 mL | 100 | |
| Y3062-30ML | 杂交液(15%甲酰胺) | 30 mL | 100 | |
| Y3057-30ML | 杂交液(20%甲酰胺) | 30 mL | 100 | |
| Y3058-30ML | 杂交液(30%甲酰胺) | 30 mL | 100 | |
| Y3081-30ML | 杂交液(35%甲酰胺) | 30 mL | 100 | |
| Y3059-30ML | 杂交液(40%甲酰胺) | 30 mL | 100 | |
| Y3060-30ML | 杂交液(50%甲酰胺) | 30 mL | 100 |
脱蜡与复水:对于石蜡包埋的组织切片,需要进行脱蜡和梯度复水处理,以去除切片上的石蜡并使组织恢复水分。
蛋白酶消化:使用蛋白酶 K对组织切片进行处理,使被遮蔽的靶核酸暴露出来,增加探针对靶核酸的可及性。
预杂交:在杂交前,使用不含探针的杂交缓冲液在杂交温度下孵育样品,以阻断玻片和标本中可能与探针产生非特异性结合的位点,降低背景信号。
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| YDP1098 | SweAMI ISH探针合成 | 40 T | 1600 | |
| YDP1081 | 探针设计合成-2OD(一端标记、DIG) | 条/2 OD | 1000 | |
| YDP1089 | 探针设计合成-2OD(两端标记、DIG) | 条/2 OD | 1690 | |
| YDP1082 | 探针设计合成-2OD(一端标记、FAM) | 条/2 OD | 800 | |
| YDP1090 | 探针设计合成-2OD(两端标记、 FAM) | 条/2 OD | 1400 | |
| YDP1083 | 探针设计合成-4OD(一端标记、FAM) | 条/4 OD | 1100 | |
| YDP1091 | 探针设计合成-4OD(两端标记、FAM) | 条/4 OD | 1990 | |
| YDP1084 | 探针设计合成-2OD(一端标记、CY3) | 条/2 OD | 1400 | |
| YDP1092 | 探针设计合成-2OD(两端标记、CY3) | 条/2 OD | 2500 | |
| YDP1085 | 探针设计合成-4OD(一端标记、CY3) | 条/4 OD | 1900 | |
| YDP1093 | 探针设计合成-4OD(两端标记、CY3) | 条/4 OD | 3300 | |
| YDP1086 | 探针设计合成-2OD(一端标记、CY5) | 条/2 OD | 1400 | |
| YDP1094 | 探针设计合成-2OD(两端标记、CY5) | 条/2 OD | 2500 | |
| YDP1087 | 探针设计合成-4OD(一端标记、CY5) | 条/4 OD | 1900 | |
| YDP1095 | 探针设计合成-4OD(两端标记、CY5) | 条/4 OD | 3300 |
设计探针:根据目标核酸序列设计探针,确保探针与目标序列具有高度的互补性。
合成探针:通过化学方法合成标记有放射性同位素、荧光染料或其他标记物的探针。
重点产品介绍:
SweAMI ISH(GDP1087)采用SweAMI原位信号放大技术,通过DNA序列重复和DNA分支结构,使得靶标处可以结合大量的信号探针,相比于传统探针直标原位杂交方法有极大优势:
1.该方法理论上实现约4000倍信号放大。使用此方法可以增强信号、提高信噪比,特异性的检测目标靶核酸。背景低,结果可靠。
2.SweAMI探针为多序列混合探针,能进一步提高杂交结合效率。
3.可以做DAB,NBT,AEC,荧光单标,双标,三标,四标。
4.探针合成周期较短,最短2天即可合好,通过流程优化,可以缩短整个实验周期。
将制备好的探针与组织或细胞样品进行杂交。杂交条件需要优化,以确保探针与靶序列的有效结合;
倾去预杂交液,滴加含探针杂交液, 恒温箱杂交过夜。
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| Y3026-100ML | 20×SSC缓冲液 | 100 mL | 30 |
杂交后需要进行一系列的洗涤步骤,以去除未结合的探针。洗去杂交液,2×SSC,40°C 洗10min,1×SSC,40°C洗2×5min,0.5×SSC室温洗10min。
加入相应的显色底物,从而显示出杂交信号。
DAB显色:切片稍甩干后,在圈内滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下控制显色时间,阳性为棕黄色,纯水冲洗切片终止显色
BCIP/NBT显色剂显色:滴加BCIP/NBT显色液,显微镜观察阳性,阳性表达为蓝色,蓝紫色。后纯水冲洗
1. FISH+IF 共染实验,FISH 实验中用的蛋白酶K会消化蛋白抗原,影响I的阳性表达,可以分开进行实验
2. 植物组织存在很强的自发荧光,严重影响阳性判断,可以选择做白光原位杂交代替荧光原位杂交。
