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慢病毒包装/稳转株构建

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实验介绍

慢病毒载体(Lentivirus vector)是以慢病毒基因组为基础,由所需的目的基因取代部分基因构建而成。目前使用的慢病毒载体多采用HIV-1基因组改造而来。与一般的逆转录病毒载体相比,慢病毒载体对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力而具有更广的宿主范围。慢病毒载体还可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而实现持久表达。在感染能力方面可以有效感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,又很少引发机体免疫反应。

1、过表达慢病毒包装


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2、沉默慢病毒包装


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稳转细胞株构建是指外源基因进入受体细胞并整合到细胞的染色体上,使目的抗原在宿主细胞膜表面进行长期稳定的表达。稳转细胞株在生物学研究中扮演着非常重要的角色,广泛用于重组蛋白和单克隆抗体生产、药物筛选、基因功能研究等应用。

1、过表达稳转株构建


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2、沉默稳转株构建


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3、稳转株WB水平验证


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