规格 磁珠法动物组织基因组DNA提取试剂盒（预封装48T） G3691-48T 48T 产品简介 本产品为48T规格预分装板，利用Servicebio Y-16 、 Y-48 全自动核酸提取仪以及自主研发的超顺磁性磁珠，在特别优化的缓冲条件下可高效、自动地从2-30 mg的各种新鲜或冻存的动物组织中纯化基因组DNA。本产品被设计用于最多同时进行48个样本的基因组DNA提取，整个过程在1小时内完成，可替代当前耗时、繁琐的乙醇沉淀步骤以及多次的漂洗步骤，极大的节省人工操作时间。提取的基因组DNA可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。 储存与运输 Proteinase K，RNase A冰袋（wet ice）运输，-20℃保存；其他试剂室温运输，室温储存；有效期12个月。 组成 Component Number Component G 3691 - 48 T G3691-1 Buffer GA 12 mL G3691-2 Proteinase K 1 mL G3691-3 RNase A 200 μL G3691-4 Buffer GB 12 mL G3691-5 96孔预封装板 3块 G3691-6 8孔磁棒套 6条 说明书 1份 使用前须知（请仔细阅读） 1. 检查预封装板是否漏液，如果出现此类现象，请勿使用。 2. 使用前观察磁珠或试剂是否粘在封口膜或试剂预分装板孔壁上，如有此现象可上下混匀后短暂离心或于桌面上轻轻敲击试剂预分装板底部至液滴掉落后再使用。 3. Buffer GA如有沉淀现象，请于65℃加热溶解，待恢复至室温后使用。 操作步骤 1. 样本裂解： a. 取新鲜、超低温冻存的动物组织2-30 mg，置于提前装有2-3颗3 mm研磨珠 （推荐 G0203-150G ） 和200 μL Buffer GA的1.5 mL Nuclease-free离心管或专用研磨管中，使用组织研磨仪 （推荐 SWE-3D ） 在常温条件下将组织彻底研磨至匀浆状 （如果组织没有被彻底匀浆，将会影响 D NA的得率和质量） ，再加入20 µL Proteinase K和4 µL RNase A，混匀后56℃孵育30 min， （每10 min混匀一次，可加速组织裂解） ，较难裂解的组织 （如尾巴、皮肤等） 可以延长裂解时间至1 h。 b. 取新鲜、超低温冻存的动物组织2-30 mg，置于提前装有200 μL Buffer GA的1.5 mL Nuclease-free离心管或专用研磨管中，把离心管置于冰浴中使用电动研磨器将组织彻底研磨至匀浆状 （如果组织没有被彻底匀浆，将会影响 D NA的得率和质量） ，再加入20 µL Proteinase K和4 µL RNase A，混匀后56℃孵育30 min， （每10 min混匀一次，可加速组织裂解） ，较难裂解的组织 （如尾巴、皮肤等） 可以延长裂解时间至1 h。 c. 取新鲜、超低温冻存的动物组织2-30 mg，迅速转移至用液氮提前预冷的研钵中，用研杵研磨组织，期间不断加入液氮，直至研磨成粉末状 （如果样本没有完全研磨成粉末状，会影响 DNA 的收率和质量） ，然后将研磨成粉末的样本转移至含有200 μL Buffer GA的1.5 mL Nuclease-free的离心管中，反复吹打混匀，再加入20 µL Proteinase K和4 µL RNase A，混匀后56℃孵育30 min， （每10 min混匀一次，可加速组织裂解） ，较难裂解的组织 （如尾巴、皮肤等） 可以延长裂解时间至1 h。 2. 12,000 rpm离心2 min，将组织上清液转移至Nuclease-free离心管中，尽量避免吸取沉淀； 3. 向离心管中加入200 μL Buffer GB，颠倒混匀，70℃放置10 min，12,000 rpm离心1 min； 4. 预封装板准备：取出深孔板，孔板离心机500 rpm离心1 min或于桌面上轻轻敲击试剂预分装板底部至液滴掉落后再小心撕去铝箔封口膜； 5. 将第3步上清液全部转移至预封装板的第1列和第7列孔位 （ 尽量避免吸取沉淀 ） ； 6. 将预封装板置于核酸提取仪相应的板位上； 7. Servicebio Y-16 、 Y-48 全自动核酸提取仪参数设置： 步骤 1 2 3 4 5 6 7 工位 3 1 2 3 4 5 3 等待时间 00:00:00 00:00:00 00:00:00 00:00:00 00:00:00 00:05:00 00:00:00 混合模式 a 2 2 2 2 2 2 2 混合时间 00:00:10 00:05:00 00:01:00 00:01:00 00:01:00 00:05:00 00:00:10 是否暂停 Ⓧ Ⓧ Ⓧ Ⓧ Ⓧ Ⓧ Ⓧ 吸磁时间 a 00:00:30 00:00:30 00:00:30 00:00:30 00:00:30 00:01:00 00:00:00 体积（µL） 600 600 500 600 600 80 600 温度（℃） --- 25.0℃ --- --- --- 25.0℃ --- a：如果不使用Servicebio Y-16 、 Y-48 全自动核酸提取仪，可根据其他适配本产品的仪器说明书调整吸磁时间和混合模式参数。 8. 安装磁套，运行程序； 9. 自动化提取步骤完成后，将第5列和第11列孔位中的核酸溶液小心转移至新的Nuclease-free离心管中，并于-20℃长期保存。 注意事项 1. 操作之前，请务必认真阅读本产品说明书。 2. 请勿将预装板倒置。 3. 请勿长时间干燥磁珠，以免影响DNA洗脱效率。 4. 实验时穿实验服，戴一次性手套，佩戴口罩，避免讲话，使用Nuclease-free的吸头和离心管避免交叉污染。 产品仅供科研用途，不用于临床诊断！ （产品包装升级中，以实物为准。 ）