可检测低至10pg/uL的多个来源的dsDNA，包括各物种的基因组DNA、PCR扩增产物、测序文库等，节省宝贵样品，在ssDNA、RNA和游离核苷酸存在的条件下， 对dsDNA亲和性远高于ssDNA和RNA 规格 PicoGreen dsDNA Reagent (200×in DMSO) G3077-0.1ML 100 μL G3077-1ML 1 mL 产品简介 本产品可对dsDNA进行精准的定量，其工作原理基于与dsDNA特异性结合后产生荧光荧光信号，且荧光强度与dsDNA浓度成正比，即使在存在ssDNA、RNA和游离核苷酸的情况下，也可快速检测低至10 pg/μL的dsDNA。因为该试剂无序列依赖性且灵敏度高，可广泛用于测量多个来源的dsDNA，包括各物种的基因组DNA、PCR扩增产物、测序文库等。 储存与运输 冰袋（wet ice）运输；-20°C避光保存；有效期12个月。 组成 Component G3077-0.1ML G3077-1ML PicoGreen dsDNA Reagent (200×in DMSO) 100 μL 1 mL 说明书 1份 使用前须知（请仔细阅读） 1. PicoGreen dsDNA Reagent溶剂为DMSO，使用时需佩戴手套和口罩。 2. 该产品不包含dsDNA标准品和PicoGreen dsDNA Reagent稀释Buffer，需自行准备。 操作步骤 1. 使用Qubit进行检测： 1) 提前计算使用0.5 mL PCR管的数量，用于标准品与样品检测 （注意：仅使用薄壁透明0.5 mL PCR管，推荐Qubit™检测管（Cat. no. Q32856）或Axygen PCR-05-C tubes（Cat. no. 10011-830）） ； 2) 在管盖上做好标记 （注意：不要在管壁做标记，以免干扰信号数据读取） ； 3) 配制检测工作液：选择合适的配制容器 （注意：禁止用玻璃容器配制工作液） ，使用1×TE Buffer按照1:199的比例将PicoGreen dsDNA Reagent (200×in DMSO)稀释至1×（假如有8个样品，加上2个标准品，需准备10个0.5 mL PCR管，每管200 µL工作液，总共需要准备2 mL的检测工作液，即取1990 µL的1×TE Buffer，加入10 µL PicoGreen dsDNA Reagent (200×in DMSO)），混匀，现配现用。 4) 制备检测标准品：分别取190 μL检测工作液至两个0.5 mL PCR管中，PCR管1#中加入10 μL ng/µL dsDNA标准品，PCR管2#中加入10 μL 10 ng/µL dsDNA标准品，在管盖上做好标记 （标准品需先插入1#，再插入2#） ，轻轻涡旋振荡2-3 s，尽量避免气泡产生，瞬时离心，将液体收集于管底。 5) 制备检测样品：取180-199 μL检测工作液至0.5 mL样本PCR管中，分别加入1-20 μL待测样本，使PCR管中液体体积为200 μL，轻轻涡旋振荡2-3 s，尽量避免气泡产生，瞬时离心，将液体收集于管底； 6) 将所有检测PCR管置于室温避光孵育2 min； 7) 按照Qubit荧光仪的操作说明，选择dsDNA High Sensitivity检测程序测定浓度。 2. 使用酶标仪进行检测： 1) 提前准备黑色发光板（推荐Servicebio LTP-96-BY或LTP-8-BK）； 2) 配制检测工作液：选择合适的配制容器 （注意：禁止用玻璃容器配制工作液） ，使用1×TE Buffer按照1:199的比例将PicoGreen dsDNA Reagent (200×in DMSO)稀释至1×（假如有8个样品，加上6个标准品，每个样本需要200 µL的工作液，总共需要准备2.8 mL工作液，即取2786 µL的1×TE Buffer，加入14 µL PicoGreen dsDNA Reagent (200×in DMSO)），混匀，现配现用。 3) 标准品制备：使用1×TE Buffer将10 ng/µL的标准品稀释一系列梯度：10 ng/µL、5 ng/µL、2.5 ng/µL、1.25 ng/µL、0.625 ng/µL、0 ng/µL；在黑色发光板的六个孔中各加入190 μL的检测工作液，再加入10 μL已准备好的六个梯度dsDNA标准品，使用移液器轻轻吹打混匀，尽量避免气泡产生； 4) 样本制备：取180-199 μL检测工作液至黑色发光板中，可按照需求分别加入1-20 μL待测样本，使发光板每孔中终体积为200 μL，使用移液器轻轻吹打混匀，尽量避免气泡产生； 5) 将混合均匀的样本室温避光孵育2 min； 6) 按照酶标仪标准操作流程设置激发/发射波长为480/520 nm检测发光板中每孔荧光值，并根据不同梯度的标准品所对应的荧光值绘制标准曲线； 7) 每次检测必须包含标准曲线制备，根据标准曲线计算样本浓度。 注意事项 1. 检测工作液建议现配现用，以保证最佳结果。 2. 已经制备好的检测标准品与检测样品在室温避光条件下可稳定保存3小时，请于3小时内完成所有检测工作。 3. 请勿将检测管拿在手中太长时间，这样会加热溶液，产生读数差异。 4. 使用酶标仪进行检测时，每次检测均应重新制备标准曲线，以防止每次操作间的差异导致的读数不准。 5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。 附操作流程简图 使用Qubit检测流程图： 使用酶标仪检测流程图： 产品仅供科研用途，不用于临床诊断！