通用型磁珠法DNA纯化试剂盒
¥450
货号:Y3612-100T
品牌:YIKE
规格:
- 100 T
数量:
规格 通用型磁珠法DNA纯化试剂盒 G3601-100T 100T 产品简介 本试剂盒利用磁珠可逆的结合核酸的特性以及特有的缓冲体系,可快速、高效的纯化PCR产物和酶切产物,还可从琼脂糖凝胶中分离高纯度的特定DNA片段。整个操作过程无需离心,仅30 min可回收80%以上的100 bp-10 kb的DNA片段。纯化后的DNA片段可应用于酶切反应、连接反应、PCR扩增、测序等分子生物学实验。 储存与运输 室温运输,室温储存;有效期12个月。 组成 Component Number Component G3601- 10 0T G3601-1 Buffer SPS 50 mL G3601-2 SweMag Beads 6 mL G3601-3 Buffer SPW 24 mL(使用前加入56 mL无水乙醇) G3601-4 Buffer TE 10 mL 说明书 1份 使用前准备 1. 使用前请向Buffer SPW中加入指定量(见瓶身)的无水乙醇。 2. 自备磁力架和1.5 mL灭菌的离心管。 操作步骤 一、从琼脂糖凝胶中回收DNA片段 1. 从琼脂糖凝胶中切下含有特异的DNA条带的凝胶块,尽量除去多余部分(切胶时不要将胶块长时间暴露于紫外灯下,防止DNA损伤)。将切下的凝胶块放入1.5 mL灭菌的离心管中(尽量捣碎胶块,有助于加快溶解),称取重量; 2. 向离心管中加入一定量的Buffer SPS(例如切下的凝胶块重量为0.1 g,则加入100 µL的Buffer SPS),60℃加热5-10 min,期间不断地上下颠倒离心管,直至胶块完全溶解; 3. 向上一步所得的溶液中加入等体积的无水乙醇,使用移液器或涡旋仪混匀,再加入0.6倍PCR体积或酶切体积的SweMag Beads(SweMag Beads使用前需涡旋至分散均匀),使用移液器或涡旋仪混匀; 4. 室温放置5 min,期间使用移液器或涡旋仪混匀2-3次,至磁珠分散均匀; 5. 将离心管移至磁力架上静置30 s,直至磁珠完全吸附,将离心管随磁力架温和地上下颠倒数次,使管壁残留的磁珠冲刷下来,待上清清澈后,吸弃上清(为避免影响提取效率,勿将磁珠吸出); 6. 加入300 μL Buffer SPW,移开磁力架,用移液器轻轻吹打至磁珠分散均匀;将离心管移至磁力架上静置30 s,再将离心管随磁力架温和地上下颠倒数次,使管壁残留的磁珠和盐分冲刷下来,待上清清澈后,吸弃上清(为避免影响提取效率,请务必吸尽离心管内残留的液体); 7. 重复操作步骤6; 8. 将离心管盖打开,室温放置5-10 min或65℃放置3-5 min,使乙醇完全挥发(避免磁珠过度干燥,以免影响核酸得率); 9. 移去磁力架,加入30-50 μL Buffer TE或Nuclease-free Water,用移液器轻轻吹打至磁珠分散均匀,室温静置3 min; 10. 将离心管置于磁力架上,直至磁珠完全吸附,吸取上清至一新的离心管中,即得高纯度的DNA。 二、从PCR反应液或酶切反应液中回收DNA片段 1. 向PCR反应体系或酶切反应体系中加入2倍体积的Buffer SPS和无水乙醇,使用移液器或涡旋仪混匀,再加入0.6倍PCR反应体积或酶切反应体积的SweMag Beads(SweMag Beads使用前需涡旋至分散均匀),使用移液器或涡旋仪混匀; 2. 室温放置5 min,期间使用移液器或涡旋仪混匀2-3次,至磁珠分散均匀; 3. 将离心管移至磁力架上静置30 s,直至磁珠完全吸附,将离心管随磁力架温和地上下颠倒数次,使管壁残留的磁珠冲刷下来,待上清清澈后,吸弃上清(为避免影响提取效率,勿将磁珠吸出); 4. 加入300 μL Buffer SPW,移开磁力架,用移液器轻轻吹打至磁珠分散均匀;将离心管移至磁力架上静置30 s,再将离心管随磁力架温和地上下颠倒数次,使管壁残留的磁珠和盐分冲刷下来,待上清清澈后,吸弃上清(为避免影响提取效率,请务必吸尽离心管内残留的液体); 5. 重复操作步骤4; 6. 将离心管盖打开,室温放置5-10 min或65℃放置3-5 min,使乙醇完全挥发(避免磁珠过度干燥,以免影响核酸得率); 7. 移去磁力架,加入30-50 μL Buffer TE或Nuclease-free Water,用移液器轻轻吹打至磁珠分散均匀,室温静置3 min; 8. 将离心管置于磁力架上,直至磁珠完全吸附,吸取上清至一新的离心管中,即得高纯度的DNA。 注意事项 1. 操作之前,请务必认真阅读本产品说明书。 2. 磁珠悬液在保存过程中应避免冷冻。 3. 磁珠易沉淀,使用前应摇匀或涡旋混匀。 4. 加入磁珠前,需要将其他试剂混合均匀。 5. 洗脱DNA前应使乙醇完全挥发,避免残留的乙醇影响下游实验。 6. 请勿长时间干燥磁珠,以免影响DNA洗脱效率。 7. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 附表 PCR或酶切反应液体积 SweMag Beads 反应次数 50 µL 30 µL 200 100 µL 60 µL 100 本产品仅供科研用途,不用于临床诊断! 附操作流程简图 (产品包装升级中,以实物为准。 )
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