规格 SweScript All-in-One RT SuperMix for qPCR (One-Step gDNA Remover) G3337-50 50 rxns G3337-100 100 rxns 产品简介 本产品包括专门为第一链cDNA合成研发的5×即用型预混液(5×SweScript All-in-One SuperMix for qPCR)和gDNA Remover试剂，可在逆转反应进行的同时去除模板的基因组残留，另外配有5×SweScript All-in-One No-RT Control SuperMix，作为无逆转录酶的对照，判断qPCR模板是否来自cDNA。预混液包含有逆转录反应所需的所有试剂(SweScript RT, RNase Inhibitor, Random Primer, Oligo(dT) 18 Primer, dNTPs以及优化的缓冲体系)。SweScript RT是通过体外进化筛选获得的突变体逆转录酶，具有热稳定性高，持续合成能力强的特点。gDNA Remover中包含一种热敏感型DNase，比活是DNase I的30倍，且只作用于dsDNA，高温条件下易失活。 储存与运输 冰袋（wet ice）运输；-20℃保存，12个月有效期。 组成 Component Number Component G333 7 -50 G333 7 -100 G3337-1 5×SweScript All-in-One SuperMix for qPCR 200 μL 400 μL G3337-2 gDNA Remover 50 μL 100 μL G3337-3 Nuclease-Free Water 1 mL 1 mL G3337-4 5×SweScript All-in-One No-RT Control SuperMix for qPCR 20 μL 40 μL 说明书 1份 1份 操作步骤 1. 第一链 cDNA合成 与gDNA去除 (1) 反应体系配制（推荐20 μL反应体系） ； Component Volume 5×SweScript All-in-One SuperMix for qPCR 4 μL gDNA Remover 1 μL Total RNA/mRNA 0.1 ng-5 μg / 10 pg-0.5 μg Nuclease-Free Water Add to 20 μL (2) 轻轻混匀并离心； (3) 逆转录程序设置： Temperature Time 25℃ 5 min 42℃ 15-30 min 85℃ 5 s 注意事项 1. 操作时请佩戴一次性手套，避免RNase污染。 2. 务必将5×SweScript All-in-One SuperMix、5×SweScript All-in-One No-RT Control SuperMix、gDNA Remover置于冰上。 3. 5×SweScript SuperMix、5×SweScript All-in-One No-RT Control SuperMix、gDNA Remover等含有高浓度甘油，使用前应短暂离心。 4. 针对高GC或复杂模板，可预先混合RNA模板、无核酸酶水并在65℃保温5 min后，迅速置冰上冷却。然后再加入其他反应组分。 5. 如需做阴性对照，只需将反应体系中的G3337-1 5×SweScript All-in-One SuperMix for qPCR等体积替换成G3337-4 5×SweScript All-in-One No-RT Control SuperMix for qPCR即可。 6. 逆转录产物可以-20℃短期保存，若需长期保存，建议分装后，于-80℃保存，避免反复冻融。 7. 如后续qPCR引物跨外显子设计，基因组去除步骤可省略。 产品仅供科研用途，不用于临床诊断！ （产品包装升级中，以实物为准。 ）