规格 PAGE彩色凝胶超快速配制试剂盒 G2041-50T 50 T G2042-50T 50 T G2043-50T 50 T G2044-50T 50 T G2045-50T 50 T 产品简介 本产品提供了简单而快速的PAGE彩色凝胶配制方法，能够快速制备下层胶（分离胶）和上层胶（浓缩胶）。本试剂盒包含两种上层胶染料（红色/绿色），可用于制备不同颜色的上层胶。该染料可在上层胶中稳定存在，不影响电泳或Western Blot等应用。本产品制备的凝胶可用于非变性PAGE凝胶电泳。本产品可制备常规尺寸的凝胶50块，具体配制的凝胶块数量与凝胶的厚薄及大小有关。 本手册适用于彩色凝胶超快速配制试剂盒系列产品（G2041，G2042，G2043，G2044，G2045）。 系列产品货号 货号 凝胶浓度 可制胶数量（大约） G2041-50T 6% 60块0.75 mm胶， 或50块1.0 mm胶， 或30块1.5 mm胶 G2042-50T 8% G2043-50T 10% G2044-50T 12% G2045-50T 15% 产品特点： 1. 点样孔清晰可见，极大提高上样效率 2. 制胶方便快捷，无需计算 3. 无需额外添加TEMED，避免异味 4. 凝胶无SDS成分，可以兼容非变性PAGE凝胶电泳 储存与运输 冰袋（wet ice）运输；改良型促凝剂-20℃保存，开封后于2-8℃保存，有效期3个月；其他2-8℃避光保存，有效期12个月。 组成 组分名称 规格 上层胶溶液A 50 mL 上层胶溶液B 50 mL 下层胶溶液A 125 mL 下层胶溶液B 125 mL 聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)上层胶红色染料(500×) 100 μL 聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)上层胶绿色染料(500×) 100 μL 改良型促凝剂 1 mL×5 说明书 1份 操作步骤 1. 根据目的蛋白分子量大小选择合适浓度的PAGE下层胶（分离胶），参照表格如下（2-8kDa大小蛋白建议使用 G2159 ， 低分子量蛋白分离、Tricine体系 ）： PAGE分离胶浓度 最佳分离范围（kDa） （Tris-Glycine普通电泳缓冲液， G2018 ） 最佳分离范围（kDa） （SWE快速高分辨电泳缓冲液， G2081 ） 6% 50-300 15-300 8% 30-130 10-250 10% 20-100 10-150 12% 10-60 8-100 15% <40 <60 2. 按照以下步骤进行制胶。具体试剂用量以及不同厚度的玻璃板所需凝胶液体积，参考下方表格。 2.1. 取等体积下层胶溶液A和下层胶溶液B，并加入适量改良型促凝剂，混匀。装配好凝胶制具，先加入配制好的下层胶溶液，然后使用蒸馏水或乙醇等溶液封住下层胶液面。 2.2. 待下层胶凝固充分（约15-30 min）后，弃去水或者乙醇，并用滤纸吸干残留的水或者乙醇。 2.3. 取等体积的上层胶溶液A和上层胶溶液B，准确吸取上层胶彩色染料加入凝胶液混匀，加入适量改良型促凝剂，混匀。上层胶染料容易沉降，使用前需充分混匀。上层胶染料也可不加，则所得凝胶上层为无色。加入配制好的上层胶溶液，插入梳子，待其凝固（约15-30 min）后即可使用。 备注：也可以事先将红色或者绿色100 μL 染料全部加入上层胶溶液B中预混使用。 配制组别 组分 0.75 mm玻璃板 1.0 mm玻璃板 1.5 mm玻璃板 下层胶溶液 下层胶溶液A 2 mL 2.5 mL 4 mL 下层胶溶液B 2 mL 2.5 mL 4 mL 改良型促凝剂 24 μL 30 μL 48 μL 上层胶溶液 上层胶溶液A 1 mL 1 mL 1.5 mL 上层胶溶液B 1 mL 1 mL 1.5 mL 改良型促凝剂 12 μL 12 μL 18 μL 上层胶红色/绿色染料(500×) 4 μL 4 μL 6 μL 3. 配制完成的凝胶如不能当天使用，可2-8℃保存1-2天。 推荐电泳条件： 使用SWE快速高分辨电泳缓冲液（ G2081 ）进行电泳：200-250 V，25-35 min； 或使用Tris-Glycine电泳缓冲液（ G2018 ）进行电泳：上层胶90 V，约30 min（marker进入分离胶） 下层胶150-180 V，约60-90 min(可根据实际情况调整)。 注意事项 1. 温差过大制胶过程产热可能会产生气泡，建议将A、B预混液配好后恢复至室温，再加改良型促凝剂。 2. 改良型促凝剂相较于过硫酸铵（AP）稳定性更好，使用时拿出一支，使用结束后于2-8℃保存，以便后续常规使用，可保存三个月；若长期不用请放置于-20℃保存，避免反复冻融。 3. 预混液中存在单体丙烯酰胺，对人体有害，操作时请注意做好防护措施。 4. 加入改良型促凝剂之后尽快灌制凝胶，请勿长时间放置。 5. 温度对于胶的凝固时间影响较大，一般温度越低，凝固时间越长，适当增加改良型促凝剂；温度越高凝胶越快，适当减少改良型促凝剂。建议温度较低的情况下（15℃含以下）促凝剂添加量加倍。 6. 如需进一步加快凝胶速度，临配胶前可按需补充适量TEMED，同时增加0.5倍改良型促凝剂使用量。 7. 如溶液A出现结晶或凝固，不可继续使用。 8. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 产品仅供科研用途，不用于临床诊断！ （产品包装升级中，以实物为准。 ）