规格 一步法手动梯度PAGE彩色凝胶快速配制试剂盒 G2193 50 T 产品简介 本试剂盒提供了简单而快速的一步法手动梯度PAGE彩色凝胶配制试剂，能够同时对大、中、小分子蛋白具有良好的梯度分离效果。 具有优良的分离效果： 能够同时对大、中、小分子蛋白具有良好的梯度分离效果。 一步法制胶，使用便捷，快速高效： 本试剂盒采用上层胶和下层胶分别设计成预混配方，只需加入改良型促凝剂即可灌胶。在灌完下层胶后无需液封压平胶面和等待凝胶，直接灌入上层胶即可。 无需添加TEMED，避免异味： 制胶过程中无需再添加TEMED，避免接触刺激性气味的试剂。 彩色上层胶，指示清晰： 本试剂盒包含两种上层胶染料（红色/绿色），可用于制备不同颜色的上层胶，点样孔清晰可见，也可区分含不同样本的凝胶。该彩色染料可在上层胶中稳定存在，不会随着电泳而迁移至下层胶，不影响电泳和染色效果，电泳完成后也便于识别上层胶并切除，不影响后续Western Blot等实验。 本试剂盒可制备常规尺寸 (1.0 mm) 的凝胶50块，具体配制的凝胶块数量与凝胶的厚薄及大小有关。 储存与运输 冰袋（wet ice）运输；改良型促凝剂-20℃保存，开封后于4℃保存，有效期3个月；电泳缓冲液（干粉）室温保存，有效期24个月；其他2-8℃避光保存，有效期12个月。 组成 组分编码 组分名称 规格 G2193-1 上层胶溶液A 50 mL G2193-2 上层胶溶液B 50 mL G2193-3 下层胶溶液A 125 mL G2193-4 下层胶溶液B 125 mL G2046-100UL 聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)上层胶红色染料(500×) 100 μL G2047-100UL 聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)上层胶绿色染料(500×) 100 μL G5036-5ML 改良型促凝剂 1 mL×5 G2193-5-20L 手动梯度胶专用电泳缓冲液（干粉） 1 L（干粉）×20 说明书 1份 操作步骤 1. 按照以下步骤进行制胶。各步骤中试剂用量以及不同厚度的玻璃板所需凝胶液体积，参考下方表格。 1.1. 装配好凝胶制具，取等体积下层胶溶液A和下层胶溶液B，混匀。 1.2. 取等体积上层胶溶液A和上层胶溶液B，混匀。注意：上层胶染料容易沉降，使用前需充分混匀。另外，上层胶染料也可不加，则所得凝胶上层为无色。 1.3. 向（1.1）的下层胶混合液溶液中加入改良型促凝剂，轻轻混匀。将混匀的凝胶液注入组装好的制胶玻璃板中，使液面和凹玻璃板上沿之间的距离比梳齿长0.5 cm即可。注意：在加入改良型促凝剂后混匀时，动作需轻柔，防止剧烈混匀产生大量气泡。下层胶溶液体积已包含适量冗余，请勿全部用于灌制下层胶，以免灌胶时上层胶高度不够。 1.4. 向（1.2）的上层胶混合溶液中加入改良型促凝剂，轻轻混匀。无需等待下层胶凝固，直接将混匀的上层胶溶液注入制胶玻璃板中，然后插入梳齿。注意：在加入改良型促凝剂后混匀时，动作需轻柔，防止剧烈混匀产生大量气泡。注入上层胶时动作尽量轻柔，避免上层胶溶液冲入下层胶。 1.5. 约15-30 min后凝胶凝固，拔去梳齿后即可进行电泳。 注意：凝胶凝固后上下层胶分界线若出现轻微不平，属正常现象，不影响后续电泳。 备注：也可以事先将红色或者绿色100 μL 染料全部加入上层胶溶液B中预混使用。 配制组别 组分 0.75 mm玻璃板 1.0 mm玻璃板 1.5 mm玻璃板 下层胶溶液 下层胶溶液A 2 mL 2.5 mL 4 mL 下层胶溶液B 2 mL 2.5 mL 4 mL 改良型促凝剂 24 μL 30 μL 48 μL 上层胶溶液 上层胶溶液A 1 mL 1 mL 1.5 mL 上层胶溶液B 1 mL 1 mL 1.5 mL 上层胶红色/绿色染料(500×) 4 μL 4 μL 6 μL 改良型促凝剂 12 μL 12 μL 18 μL 2. 配制完成的凝胶如不能当天使用，可2-8℃保存1-2天。 3. 电泳条件：使用手动梯度胶专用电泳缓冲液进行电泳：200-250 V，25-35 min；可根据需求自行调整。 注意事项 1. 本产品不适用于非变性凝胶电泳。 2. 温差过大制胶过程产热可能会产生气泡，建议将A、B预混液配好后恢复至室温，再加改良型促凝剂进行灌胶，可有效避免凝胶过程中细小气泡的形成。 3. 改良型促凝剂相较于过硫酸铵（AP）稳定性更好，使用时拿出一支，使用结束后于4℃保存，以便后续常规使用，可保存三个月；若长期不用请放置于-20℃保存，避免反复冻融。 4. 预混液中存在单体丙烯酰胺，对人体有害，操作时请注意做好防护措施。 5. 为了保证样本同时进入分离胶，直接灌制上层胶时需缓慢均匀的加入配制好的上层胶溶液。 6. 加入改良型促凝剂之后尽快灌制凝胶，请勿长时间放置。 7. 温度对于凝固时间影响较大，一般温度越低，时间越长，可适当增加改良型促凝剂用量；温度越高凝胶越快，可适当减少改良型促凝剂用量。建议温度较低的情况下（15℃含以下）促凝剂添加量加倍。 8. 如需进一步加快凝胶速度，临配胶前可按需补充适量TEMED，同时增加0.5倍改良型促凝剂使用量。 9. 如溶液A出现结晶或凝固，不可继续使用。 10. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 产品仅供科研用途，不用于临床诊断！