规格 考马斯亮蓝G250 G2039-250ML 250 mL 产品简介 考马斯亮蓝G250能与蛋白质快速结合。考马斯亮蓝G250在游离状态下最大光吸收在488 nm，其与蛋白质结合后呈蓝色，在595 nm处有最大吸收值，并且光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量检测。本产品也可以作为 G2001 Bradford法蛋白定量检测试剂盒 的补充试剂。 储存与运输 常温保存与运输，有效期12个月。 使用方法 1. （可选）绘制标准曲线（酶标仪法）：将BSA用水溶解配制0.5 mg/mL的蛋白标准工作液。将蛋白标准工作液分别按0，1，2，4，8，12，16，20 μL加到96孔板中，然后用PBS或生理盐水依次加20，19，18，16，12，8，4，0 μL将上述梯度工作液补足到20 μL。得到蛋白浓度依次为0，25，50，100，200，300，400，500 μg/mL的梯度曲线。如只是做相对定量比较，则无需绘制标准曲线。 2. 准备待测样品：将待测的蛋白样品进行适当稀释（可通过预实验检测，使样品蛋白浓度在标准曲线范围内，确保检测结果可信），按照每个样品20 μL的量加到96孔板中。待测样品稀释需与蛋白标准品用相同溶液。 3. 检测：向以上每孔加入200 μL考马斯亮蓝G250溶液充分混匀（可将96孔板放在振荡器上振荡30 s），室温放置3-5 min后，以标准曲线0号做参比，在595 nm波长下比色测定，记录各孔吸光度值。 4. 计算：以标准曲线中梯度蛋白含量（μg/mL）为横坐标，吸光值为纵坐标，绘出标准曲线。根据所测样品的吸光值，在标准曲线上即可查得相应孔中待测样品的蛋白浓度（μg/mL），再乘以样品稀释倍数即为待测样品实际蛋白浓度。 另：如用分光光度计测定，则用玻璃试管或玻璃比色管为反应容器制作标准曲线。待测蛋白样品做适当稀释后，加入到新的玻璃试管或比色管中，样品量为1 mL。向标准曲线梯度管及样品管中各加入考马斯亮蓝G250溶液3 mL，充分混匀，室温静置3-5 min后用分光光度计进行比色检测。 检测时分光光度计波长设置595 nm，以标准曲线0号管为参比调零，检测标准曲线及待测样品。按照步骤4的方法绘制标准曲线及计算待测样品中的蛋白浓度。 注意事项 1. 本产品使用前需恢复至室温，并颠倒混匀，以免影响检测的灵敏度。 2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！ （产品包装升级中，以实物为准。 ）