产品信息

产品简介

T4 Polynucleotide Kinase，即T4多聚核苷酸激酶，来源于T4噬菌体由大肠杆菌重组表达，是一种多聚核苷酸5’-羟基激酶，能够催化ATP的γ-磷酸基团转移到寡核苷酸链（双链或单链DNA或者RNA）的5’-羟基末端以及3’-单磷酸核苷上，并且该反应是可逆的。也具有3’-端磷酸酶活性，将3’-磷酸基团从寡核苷酸的3’-磷酸末端、脱氧3’-单磷酸核苷和脱氧3’-二磷酸核苷上水解。主要用于DNA及RNA 5‘末端标记、合成DNA接头的5’末端磷酸化。

来源：来源于T4噬菌体，由大肠杆菌重组表达。

酶活定义：在37℃条件下，30 min内使1 nmol [γ-32P]ATP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为一个酶活单位。

纯度及浓度：SDS-PAGE检测纯度≥95%；内源性核酸残留量＜1 pg/μL（qPCR检测）；10 U/μL。

失活：65℃孵育20 min酶即可失活。

酶存储buffer：10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，50%Glycerol，pH 7.4。

10х Reaction buffer：500 mM Tris-HCl，100 mM MgCl₂，5 mM DTT，pH 7.6。

储存与运输

冰袋（wet ice）运输；-20℃保存，12个月有效期。

组成

操作步骤

DNA或RNA 5‘末端磷酸化：

1. 按照下表配置反应体系

2. 反应体系充分混匀后于37℃孵育30 min。

3. 反应结束后体系于65℃孵育20 min终止反应。

注意事项

1. T4 DNA ligase buffer含有1mM ATP，所以T4 Polynucleotide Kinase可以与T4 DNA ligase共buffer。

2. 酶的取用都应放在冰盒内，使用完毕后立即存储于-20℃。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

产品仅供科研用途，不用于临床诊断！

（产品包装升级中，以实物为准。）