Bst DNA polymerase, Large Fragment
- 1600 U
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 |
Bst DNA polymerase, Large Fragment | G3403-1600U | 1600 U |
产品简介
本产品Bst DNA polymerase, Large Fragment，来源于Bacillus stearothermophilus，截短改造后由大肠杆菌重组表达，具有5′→3′DNA聚合酶活性以及很强的链置换活性，缺失5′→3′核酸外切酶活性。Bst DNA polymerase, Large Fragment主要用于等温扩增反应，如LAMP (Loop-mediated isothermal amplification)，RCA (Rolling-circle amplification)等。
来源：来源于Bacillus stearothermophilusDNA polymerase I的大片段通过大肠杆菌重组表达。
酶活定义：在65℃条件下，30 min内将10 nmol dNTP掺入酸不溶沉淀物所需要的酶量定义为一个酶活单位。
纯度及浓度：SDS-PAGE检测纯度≥95%；内源性核酸残留量＜1 pg/μL（qPCR检测）；8 U/μL。
失活：80℃加热20 min。
酶储存缓冲液：10 mM Tris-HCl, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.1% Triton X-100, 50% Glycerol, pH 7.1。
10×Bst Reaction Buffer：200 mM Tris-HCl, 100 mM (NH4)2SO4, 100 mM KCl, 20 mM MgSO4, 1% Triton X-100, pH 8.8。
储存与运输
冰袋（wet ice）运输；-20℃保存，12个月有效。
组成
Component Number | Component | G3403-1600U |
G3403-1 | Bst DNA polymerase, Large Fragment | 200 μL |
G3403-2 | 10×Bst Reaction Buffer | 1 mL |
G3403-3 | MgSO4 (100 mM) | 500 μL |
说明书 | 1份 | |
操作步骤
1. 等温扩增（LAMP）：
Component | Volume |
10×Bst Reaction Buffer | 2.5 μL |
MgSO4 (100 mM) | 1.5 μL |
dNTP Mix (10 mM) | 3.5 μL |
FIP/BIP Primers (100 μM) | 0.4/0.4 μL |
F3/B3 Primers (10 μM) | 0.5/0.5 μL |
LoopF/LoopB Primers (10 μM) | 2/2 μL |
Bst DNA polymerase, Large Fragment | 1 μL |
Template DNA | 1 μL |
Nuclease-Free Water | To 25 μL |
按上标配置反应体系（除了Template DNA外），轻轻混匀后短暂离心沉淀液体。
2. 加入相应体积模板DNA，使总体积为25 μL，用移液器轻轻吹打混匀后短暂离心。
3. 将反应体系60℃-65℃恒温孵育1 h。
4. 根据不同实验需求，可在LAMP反应体系中加入Hydroxy naphthol blue或者酚红进行可视化指示，也可以用凝胶电泳进行检测分析。
注意事项
1. Bst DNA polymerase, Large Fragment不能用于热循环测序和PCR。
2. 酶制品使用时应放在冰盒内或冰浴，使用完毕后应立即放置于-20℃保存，建议分装保存。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品仅供科研用途，不用于临床诊断！
（产品包装升级中，以实物为准。）
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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