Tth DNA polymerase
- 250 U
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 |
Tth DNA polymerase | G3447-250U | 250 U |
产品简介
Tth DNA聚合酶是来自于嗜热真细菌Thermus thermophiles HB8的DNA聚合酶，由大肠杆菌重组表达，具有5′-3′DNA聚合酶，没有3′-5′和5′-3′核酸外切酶活性，也没有非特异性脱氧核糖核酸酶和核糖核酸酶活性。在有Mg2+等二价阳离子存在的情况下，具有DNA聚合酶活性，与Taq酶一样被广泛用于PCR反应，但耐热性比Taq酶高，因此对于高GC含量模板的PCR反应也有较好的效果。同时该酶具有逆转录酶活性，在Mn2+存在时其逆转录酶活性会得到极大增强。利用其独有的特性，可以应用在一步法RT-PCR。
来源：来源于嗜热真细菌Thermus thermophiles HB8，由大肠杆菌重组表达。
酶活定义：在74℃条件下，30 min内掺入10 nmol的核苷酸为酸性不溶物所需的酶量定义为一个酶活单位。
纯度及浓度：SDS-PAGE检测纯度≥95%；内源性核酸残留量＜1 pg/μL（qPCR检测）；5 U/μL。
酶存储buffer：10 mM Tris-HCl，300 mM KCl，0.1 mM EDTA，1 mM DTT，0.1% Triton X-100，50% Glycerol，pH 7.5。
储存与运输
冰袋（wet ice）运输；-20℃保存，12个月有效期。
组成
Component Number | Component | G3447-250U |
G3447-1 | Tth DNA polymerase | 50 μL |
G3447-2 | 10х PCR Reaction buffer | 1 mL |
G3447-3 | 5х RT-PCR buffer | 1 mL |
G3447-4 | dNTP Mix(10 mM each) | 100 μL |
G3447-5 | MnCl2（25 mM） | 200 μL |
说明书 | 1份 | |
操作步骤
1. 常用的PCR反应体系（1 kb以下）：
Component | Volume |
10х PCR Reaction buffer | 2 μL |
Tth DNA polymerase | 1 μL |
dNTP Mix(10 mM each) | 1 μL |
Forward primer/Reverse primer | 0.2-1 μM |
Template | 5 ng（可调整） |
Nuclease-Free water | To 20 μL |
对应的PCR反应程序：
Temperature | Time | Cycles |
95℃ | 3 min | 1 |
94℃ | 30 s | 30-40 |
55℃ | 30 s | |
72℃ | 45 s | |
72℃ | 10 min | 1 |
2. 常用的RT-PCR反应体系：
Component | Volume |
5х RT-PCR buffer | 4 μL |
Tth DNA polymerase | 1 μL |
MnCl2（25 mM） | 1 μL |
dNTP Mix(10 mM each) | 1.5 μL |
Forward primer/Reverse primer | 0.2-1 μM |
Template | 5 ng（可调整） |
Nuclease-Free water | To 20 μL |
对应的RT-PCR反应程序：
Temperature | Time | Cycles |
60℃ | 30 min | 1 |
95℃ | 3 min | 1 |
95℃ | 20 s | 30-40 |
60℃ | 1 min |
注意事项
1. 酶的取用都应放在冰盒内，使用完毕后立即存储于-20℃。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品仅供科研用途，不用于临床诊断！
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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