产品信息

产品简介

本产品利用等温扩增技术与可视化颜色变化能够快速检测细胞培养液中常见的8种支原体，无需DNA提取，直接在反应液中加入1 µL细胞培养上清，65℃反应30 min，阳性样本反应液颜色由黄色变为红色，整个过程无需PCR仪，无需开盖电泳，可有效避免气溶胶造成的交叉污染。与传统的PCR法相比，本产品操作简便、灵敏度非常高，可耐受培养基中的多种PCR抑制剂，因此不会出现假阴性现象，检测结果与qPCR具有极高的一致性。

储存与运输

冰袋（wet ice）运输；-20℃保存；有效期12个月。

组成

a：包含显色剂。

实验前准备

1. 65℃水浴锅或金属浴；

操作步骤

1. 待测样本准备

1) 贴壁细胞：直接吸取上清。建议在细胞接种或换液3天以上，汇合度达到90%左右时取样，此时上清中支原体含量较高，容易检出。

2) 悬浮细胞：1000 rpm离心5 min后，取上清。建议在细胞接种或换液3天以上时取样，此时细胞培养液中支原体含量较高，容易检出。

2. 反应体系

 a：Mycored Buffer解冻后颠倒混匀使用。

 b：根据样本数量，将以上反应体系配好之后，分装到反应管中，加入20 µL的Paraffin Oil，再进行下一步。

3. 加样

1）. 阴性对照：第一个反应管中不加任何样本作为阴性对照；

2）. 阳性对照：向最后一个反应管中加入1 μL Positive Control作为阳性对照；

3）. 待测样本：向其余反应管中加入1 μL细胞培养上清。

请将枪头伸向Paraffin Oil液面下加样。

4. 反应条件。

将反应管转移至提前预热的65℃水浴锅或金属浴中，孵育30 min，如果显色不明显可将反应时间延长至40 min。

结果判定

反应结束后立即将反应管取出，待恢复至室温后，如果反应液仍为黄色，判断结果为阴性；如果反应液变为红色，判断结果则为阳性。反应管不可开盖，否则很容易导致气溶胶污染。

图例：

注意事项

1. 反应结束后请勿打开反应管。

2. 建议在配制反应液过程中使用带滤芯的吸头，并将弃掉的吸头和反应管放入自封袋中，及时处理。

3. 请经常使用核酸清除剂（推荐G3020）擦拭实验台和移液器。

产品仅供科研用途，不用于临床诊断！