SweTransRNA转染试剂
- 0.5 mL
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 |
SweTransRNA转染试剂 | G1806-0.5ML | 0.5 mL |
产品描述
本产品是一款高性能的脂质体型的siRNA、miRNA等寡核苷酸专用转染试剂，可将寡核苷酸类RNA直接递送到靶细胞的细胞质，而不被核酸酶降解。基因表达过程在细胞质中进行，无需进入细胞核且不受靶细胞转录调控作用的限制。本产品具有毒性极低、稳定性好、容易操作、重复性好等优点。可适用于多种贴壁细胞和悬浮细胞的RNA转染。
储存与运输
冰袋（wet ice）运输；2-8℃保存，12个月有效。
试剂盒组成
Component | G1806-0.5ML |
SweTransRNA转染试剂 | 0.5 mL |
产品说明书 | 1份 |
操作步骤
1. 贴壁细胞转染前准备工作（12孔板为例，其他规格参考附表）：
a) 转染前一天，将细胞以合适的密度均匀种植于孔板中，以正式转染时细胞汇合度为70-85%为宜。
b) 转染前，去除原细胞培养基，用常温PBS缓冲液洗涤细胞1-2次后，更换成0.9 mL不含血清的基础培养基或Swe细胞转染培养基opti-MEM（货号：G4568）。
c) 将换液后的细胞放置于细胞培养箱中，并开始配制转染复合物。
2. 悬浮细胞转染前准备工作：
a) 转染当天，将适量的细胞，离心去除培养基后，用不含血清的基础培养基或Swe细胞转染培养基opti-MEM（货号：G4568）重悬细胞至适宜浓度，均匀接种0.9 mL重悬液于孔板中。
b) 将接种悬浮细胞的孔板放置于细胞培养箱中，并开始配制转染复合物（转染复合物和培养基之间体积比，可以参考贴壁细胞的比值，进行适当调整）。
3. 转染复合物准备：
a) 配制A液：50 μL不含血清的基础培养基与40 pmol的RNA，吹打混匀。
b) 配制B液：50 μL不含血清的基础培养基与2-4 μL SweTransRNA转染试剂，吹打混匀。
c) 室温静置A液、B液5分钟。
d) 将B液加到A液中，轻轻吹打混匀，继续室温孵育15 min，使其形成RNA-转染试剂复合物。
4. 转染细胞：
a) 将上一步得到的RNA-转染试剂复合物，均匀滴加到细胞中。轻轻摇动培养板，使转染复合物与孔板中培养基充分混合，将孔板置于37℃，5% CO2培养箱中孵育。
b) 孵育4-6 h后，不同的细胞，更换成对应的新鲜培养基，放置培养箱中继续培养。
c) 转染24-48 h后，观察或收集细胞进行下游实验。
注意事项
1. 请使用状态良好的健康细胞，复苏的细胞建议至少传代两次后再进行转染。
2. 请使用高质量RNA进行转染。
3. 细胞耐受的前提下，可以适当延长RNA-转染试剂复合物孵育细胞时间，转染效果更佳；RNA和转染试剂的使用比例，可视情况酌情调整。
4. 为了您的健康和安全，操作时请穿好实验服、戴好手套。
附表：不同培养板所需转染试剂和RNA用量
培养器皿 | 单孔面积 | 接种细胞数 | siRNA/miRNA转染 | 总体积 | ||
稀释用培养基 | 转染试剂 | RNA | ||||
96孔板 | 0.3 cm² | (0.5-5.0)×104 | 2×10 μL | 0.25-0.5 μL | 5 pmol | 0.1 mL |
24孔板 | 2.0 cm² | (0.25-2.5)×105 | 2×25 μL | 1.0-2.0 μL | 20 pmol | 0.3-0.5 mL |
12孔板 | 4.0 cm² | (0.5-5)×105 | 2×50 μL | 2.0-4.0 μL | 40 pmol | 0.5-1.0 mL |
6孔板 | 9.5 cm² | (1.0-10)×105 | 2×100 μL | 4.0-8.0 μL | 80 pmol | 1-2.0 mL |
本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！
（产品包装升级中，以实物为准。）
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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