产品信息

产品描述

本产品是新一代性能优良的阳离子聚合物型的DNA转染试剂，它具有超强的DNA结合、递送能力，可用于质粒DNA的转染。本产品与质粒DNA结合受培养基中血清的影响较小，具有毒性极低，稳定性好，转染简单易行，重复性好等优点。可用于多种类型细胞的瞬时转染及稳定转染。

储存与运输

冰袋运输；2-8℃避光保存，12个月有效。

试剂盒组成

操作步骤

1. 贴壁细胞转染前准备工作（6孔板为例，其他规格参考附表）：

a) 转染前一天，将细胞以合适的密度均匀种植于孔板中，以正式转染时细胞汇聚至70-85%为宜；

b) 转染前，去除原细胞培养基，用常温PBS缓冲液洗涤细胞1-2次后，更换1.9 mL不含血清或者低血清（5%以下）的基础培养基（不同细胞对于血清依赖性不同，请视情况调整血清占比）；

c) 将换好液的细胞放置于细胞培养箱中，并开始配制转染复合物；

2. 悬浮细胞转染前准备工作：

a) 转染当天，将适量的细胞，离心去除培养基后，用不含血清或者低血清（5%以下）的基础培养基重悬细胞至适宜密度，均匀接种1.9 mL重悬液于孔板中；

b) 将接种好的悬浮细胞放置细胞培养箱中，并开始配制转染复合物（转染复合物和培养基之间体积比，可以参考贴壁细胞的比值，进行适当调整）；

3. 转染复合物准备：

a) 配制A液：50 μL不含血清的基础培养基与3μg质粒DNA，吹吸混匀；

b) 配制B液：50 μL不含血清的基础培养基与9-15μL SweTransDNA转染试剂，吹吸混匀；

c) 室温静置A液、B液5分钟；

d) 将B液加到A液中，轻轻吹打混匀，继续室温孵育15-20 min，使其形成DNA-转染试剂复合物；

4. 转染细胞：

a) 将上一步得到的DNA-转染试剂复合物，以孔板一边画“十“字，一边均匀滴加的方式，添加到”步骤1“或步骤2”换好液的孔板中；

b) 轻轻摇动培养板（以画“8”字或其他方式），促使含转染复合物的培养基与孔板中培养基充分混合后，将孔板置于37℃，5% CO₂培养箱中孵育；

c) 孵育4-6 h后，不同的细胞，更换成对应的新鲜培养基，放置培养箱中继续培养；

d) 转染24-48 h后，观察或收取细胞。

注意事项

1. 请使用状态良好的健康细胞，复苏的细胞建议至少传代2次后再进行转染。

2. 请使用高质量、无内毒素的质粒DNA。

3. 产品初次使用，建议分装，避免反复冻融

4. 细胞耐受的前提下，可以适当延长DNA-转染试剂复合物孵育时间，转染效果更佳；DNA和转染试剂的使用比例，可视情况酌情调整。

5. 为了您的健康和安全，操作时请穿好实验服、戴好手套。

本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！

附表：不同培养板所需转染试剂和DNA用量