产品信息

产品描述

本产品是一款高性能的阳离子聚合物型的RNA专用转染试剂，可将RNA直接递送到靶细胞的细胞质，而不被核酸酶降解。基因表达过程在细胞质中进行，无需进入细胞核且不受靶细胞转录调控作用的限制。本产品具有受血清影响较小、毒性极低、稳定性好、容易操作、重复性好等优点。可适用于多种贴壁细胞和悬浮细胞的RNA转染。

储存与运输

冰袋（wet ice）运输；2-8℃保存，12个月有效。

试剂盒组成

操作步骤

1. 贴壁细胞转染前准备工作（6孔板为例，其他规格参考附表）：

a) 转染前一天，将细胞以合适的密度均匀种植于孔板中，以正式转染时细胞汇聚至70-85%为宜。

b) 转染前，去除原细胞培养基，用常温PBS缓冲液洗涤细胞1-2次后，更换1.9 mL不含血清或者低血清（5%以下）的基础培养基（不同细胞对于血清依赖性不同，请视情况调整血清占比）。

c) 将换液后的细胞放置于细胞培养箱中，并开始配制转染复合物。

2. 悬浮细胞转染前准备工作：

a) 转染当天，将适量的细胞，离心去除培养基后，用不含血清或者低血清（5%以下）的基础培养基重悬细胞至适宜浓度，均匀接种1.9 mL重悬液于孔板中。

b) 将接种悬浮细胞的孔板放置于细胞培养箱中，并开始配制转染复合物（转染复合物和培养基之间体积比，可以参考贴壁细胞的比值，进行适当调整）。

3. 转染复合物准备：

a) 配制A液：50 μL不含血清的基础培养基与80 pmol的RNA，吹吸混匀。

b) 配制B液：50 μL不含血清的基础培养基与4-20 μL SweTransRNA转染试剂，吹吸混匀。

c) 室温静置A液、B液5分钟。

d) 将B液加到A液中，轻轻吹打混均，继续室温孵育15-20 min，使其形成RNA-转染试剂复合物。

4. 转染细胞：

a) 将上一步得到的RNA-转染试剂复合物，以孔板一边画“十“字，一边均匀滴加的方式，添加到”步骤1“或步骤2”换好液的孔板中。

b) 轻轻摇动培养板（以画“8”字或其他方式），促使含转染复合物的培养基与孔板中培养基充分混合后，将孔板置于37℃，5% CO₂培养箱中孵育。

c) 孵育4-6 h后，不同的细胞，更换成对应的新鲜培养基，放置培养箱中继续培养。

d) 转染24-48 h后，观察或收取细胞。

注意事项

1. 请使用状态良好的健康细胞，复苏的细胞建议至少传代两次后再进行转染。

2. 请使用高质量RNA进行转染。

3. 产品初次使用，建议分装，避免反复冻融。

4. 细胞耐受的前提下，可以适当延长RNA-转染试剂复合物孵育时间，转染效果更佳；RNA和转染试剂的使用比例，可视情况酌情调整。

5. 为了您的健康和安全，操作时请穿好实验服、戴好手套。

附表：不同培养板所需转染试剂和RNA用量

本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！

（产品包装升级中，以实物为准。）