产品信息

产品描述

Lyso-Tracker Green，是一种溶酶体绿色荧光探针，可用于对活细胞溶酶体特异性染色。该染料的最大激发波长和发射波长是504/511nm，可使用FITC滤光片有效激发。该探针由一个荧光基团和相连的弱碱基构成，可以自由穿透细胞，向具有弱酸性内环境的溶酶体内聚集，从而实现对溶酶体进行标记。

储存与运输

干冰(dry ice)运输；-20℃避光保存，12个月有效。

试剂盒组成

操作步骤

1 检测工作液配制：

1.1 本产品为1 mM存储液，实验前回温至室温，短暂低速离心，确保试剂沉置管底；

1.2 将其经缓冲液（Hanks、PBS等，建议使用Hanks）或基础培养基（不含血清），稀释成50-100 nM的溶酶体检测工作液（Lyso-Tracker Green荧光探针工作浓度，可以视情况进行一定的调整，但是为了避免探针浓度过高，导致探针特异性下降，造成假阳性等现象，建议使用较低的浓度）；

2 细胞染色（以下为贴壁细胞方案，悬浮细胞换液需要离心操作）：

2.1 正常或处理过后的细胞，用缓冲液洗涤1-2次，每次3-5 min；

2.2 加入预热的溶酶体检测工作液，于细胞培养箱中，37℃孵化30-60 min（建议先在荧光显微镜下观察荧光效果，如果效果不明显，可以适当延长孵化时间）；

2.3 去除孵化液，用缓冲液清洗2-3次，每次3–5 min；

3 镜检：荧光显微镜下观察，选择FITC滤光片，激发波长504nm，发射波长511nm。

注意事项

1. 由于细胞的种类和状态不同，染料的工作浓度以及孵化的时间，可以进行适当调整；对探针的内化动力学研究表明，探针进入活细胞仅需数秒即可。值得注意的是探针会导致溶酶体出现“碱化效应”，因此长时间的孵育会引起溶酶体pH值的增加。

2. 该染料需要活细胞状态下，进行溶酶体定位，且不宜后续固定细胞等操作。

3. 在对活细胞进行染色和洗涤时，检测工作液和洗涤缓冲液需37℃预热，染色及洗涤通过在培养箱中孵育完成，以免温差刺激影响细胞形态。

4. 该探针荧光易淬灭，需要染完尽快拍照，整个染色过程需避光操作。

5. 探针母液需分装保存，避免反复冻融。为了避免浪费，染色工作液按需配制，现配现用。

6. 为了您的健康和安全，操作时请穿好实验服、戴好手套。

本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！