Swe基质胶产品实验手册.pdf（可点击下载查看）

产品信息

产品描述

Swe基质胶是从富含胞外基质蛋白的EHS（Engelbreth-Holm-Swarm）小鼠肿瘤中提取出的可溶性基底基质。其主要成分由层粘连蛋白（Laminin），Ⅳ型胶原（Col-Ⅳ），巢蛋白（Entactin）和硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（Heparan sulphate proteoglycans）等组成，同时还包含表皮生长因子（EGF）、转化生长因子（TGF-beta）、类胰岛素生长因子（IGF）、成纤维生长因子（FGF）、组织纤溶酶原激活物和EHS肿瘤自身含有的其他生长因子。在室温条件下，基质胶可快速聚合形成具有生物学活性的三维基质，模拟体内细胞基底膜的组成、结构以及物理特性和功能，可促进体外细胞如：上皮细胞、血管内皮细胞、黑色素瘤细胞以及干细胞等的增殖和分化，在研究细胞形态、生理功能、侵袭以及促进难成瘤细胞成瘤等方面具有重要作用。

Swe基质胶为无菌制品，不含影响实验动物的相关病毒，蛋白浓度为8-12 mg/mL，可以应用于血管生成、体内成瘤、3D类器官培养以及肿瘤细胞侵袭等实验研究。

储存与运输

干冰运输，-20 ℃避光保存，有效期2年；初次解冻后请适当分装储存于-20 ℃冰箱，请不要储存于无霜冰箱中。

产品组成

产品特性

1. Swe基质胶在冻融过程中可能会发生颜色变化，这是由于产品中的碳酸氢盐缓冲液和和二氧化碳以及酚红的作用，颜色会从淡黄色变化到深红色，该颜色变化会在5 %CO₂平衡下消失，属于正常现象，不会影响产品功能。不含酚红款颜色为白色或淡黄色，则不存在此现象。

2. Swe基质胶易凝胶化，因此需将本产品置于冰中并放在4℃冰箱中过夜解冻。一但本产品被解冻，可以旋涡小瓶以确保产品均一性，不可用力吹打产品以免产生大量气泡，从而影响产品性能。

3. Swe基质胶为胶状液体，在10 ℃以上会逐渐凝胶化，因此，在使用本产品过成中，需注意所有与本产品直接接触的如：吸头、培养皿、培养板以及培养基等都应提前预冷或者冰冻。

4. 本产品蛋白浓度具体批次差异性，在产品COA中标注有具体浓度，需根据实验需求以及具体蛋白浓度确定本产品的用量，以确保实验准确性，但不建议将本产品稀释到低于3 mg/mL。

产品使用

1. 基质胶的解冻、分装（请将本产品全程保持在冰上）

解冻：将本产品置于冰中并放在4℃冰箱中过夜解冻，需注意勿将本产品放在冰箱门上或者经常开启的冰箱中，以免温度差异影响产品性能。产品解冻后，旋涡小瓶以确保产品均一性。

分装：根据实验需求，使用预冷的吸头或者移液管吸取本产品，分装置预冷的无菌离心管中，然后将分装的产品置于-20 ℃或以下稳定避光保存。在分装吸取过程中，如若吸头或者移液管堵塞，请及时跟换新的预冷吸头或者移液管，分装时注意无菌操作。

2. 基质胶常见包被方法

基质胶有多种不同的包被方法，如薄层凝胶法、厚层凝胶法和薄层包被法等，适用于不同实验，可根据具体的实验目的选择合适的包被方法。

1) 薄层凝胶法：即由基质胶形成的凝胶厚度约为0.5 mm，将细胞铺于薄层凝胶上培养。该方法主要适用于细胞贴壁和增殖，如血管形成实验）

（a）提前一天将基质胶置于冰上并放在4 °C冰箱过夜解冻，解冻后可旋涡小瓶或使用预冷的移液管/吸头，轻微吹打将基质胶混合至均匀。

（b）将培养板放置在冰上，按照50 µL/cm²向生长表面加入基质胶。

（c）将培养板放置在37 °C，30 min以固化基质胶。

（d）（选做）请在使用无血清培养基轻柔漂洗前吸出未结合的材料，请确保移液器的吸头不要刮擦包被的表面。

2) 厚层凝胶法：即由基质胶形成的凝胶厚度约为1-2 mm，细胞在凝胶内部生长。该方法主要适用3D类器官培养等实验）

（a）提前一天将基质胶置于冰上并放在4 °C冰箱过夜解冻，解冻后可旋涡小瓶或使用预冷的移液管/吸头，轻微吹打将基质胶混合至均匀。

（b）将培养板放置在冰上。向基质胶中加入细胞并使用预冷的移液管悬浮。按照150-200 µL/cm²向生长表面加入混合基质胶。

（c）将培养板放置在37 °C，30min以固化基质胶。

（d）可根据实验需求补加培养基，同时该方法也可将细胞培养在凝胶的顶部。

3) 薄层包被法：使用较低的基质胶浓度，使其形成混合的蛋白包被层，而不形成凝胶，将细胞铺于该薄层上培养。该方法主要适用于细胞粘附实验，也可用于肿瘤细胞Transwell体外侵袭等实验。

（a）提前一天将基质胶置于冰上并放在4 °C冰箱过夜解冻，解冻后可旋涡小瓶或使用预冷的移液管/吸头，轻微吹打将基质胶混合至均匀。

（b）使用预冷的无血清培养基或PBS将基质胶稀释到需要的浓度。

（c）向被包被的容器中加入稀释的基质胶，加入的量应该足以容易地覆盖整个生长表面，在室温下培养1-2 h（根据基质胶凝固时间确定）。

（d）吸出未结合的材料并使用无血清培养基轻柔地漂洗后即可使用，请确保移液器的吸头不要刮擦包被的表面。

注意事项

1. 本产品为干冰运输，解冻前为白色或淡黄色固体，若到货时，泡沫箱中已无干冰且产品呈现凝胶状态，请及时联系我们。

2. 如果不使用时，请将本产品置于-20 ℃或以下温度避光保存，请勿将本产品保存于无霜冰箱中。

3. 本产品不可反复冻融，为保证产品性能，请在第一次解冻后根据实验需求进行分装。

4. 本产品为无菌制品，请在无菌环境下进行分装以及使用。

5. 本产品易凝胶化，在取用过程中请勿用手直接接触瓶身，以免体温引起产品凝固，同时请保证与产品直接接触的吸头、培养皿、培养板以及培养基等提前预冷或冰冻。

6. 实验过程中，请将本产品全程保持在冰上，如果产品出现凝固，则产品不可继续使用。

7. 实验结束后，剩余基质胶不可留待下次使用。

本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！

（产品包装升级中，以实物为准。）