
Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型
- 20 mL
Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型可作为培养上皮细胞、肝细胞和成纤维细胞等细胞的理想底物,用于包被培养皿表面以促进细胞贴壁和增殖,或作为三维培养基质模拟体内细胞外基质环境,为细胞立体生长和组织构建提供支持
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 |
Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型 | G4140-2ML | 2 mL |
G4140-20ML | 20 mL |
产品描述
胶原蛋白I型是人体中最丰富的蛋白质,占总蛋白质的30 %,由不断重复G-X-Y的三条多肽链(两个α1链和一个α2链)组装成一种三链螺旋结构,为骨骼、肌腱、韧带和皮肤等组织提供强度和弹性。胶原蛋白Ⅰ型在细胞生长、分化、附着和细胞迁移中起着关键作用,因此许多体外实验方法,如细胞嵌入胶原蛋白凝胶、水凝胶制备、黏附实验等,已被开发用于研究细胞与细胞外基质相互作用的各个方面。
Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型可作为培养上皮细胞、肝细胞和成纤维细胞等细胞的底物,用于包被培养皿表面或为细胞的三维培养提供基质。
Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型为溶于0.02 M 乙酸,浓度为5 mg/mL的无菌制品。
储存与运输
冰袋运输,2-8 ℃避光保存,12个月有效期;切勿冻存。
产品组成
Component Number | Component | G4140 | |
G4140 | Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型 | 2 mL | 20 mL |
产品说明书 | 1 份 | ||
产品使用
1. 细胞培养皿的表面包被
可根据不同的实验需求选择蛋白浓度,建议包被浓度为5 μg/cm2。
(1) 用0.02 M 乙酸溶液将胶原蛋白稀释至50 μg/mL,参考表 1 包被液推荐用量表添加到培养器材中。
(2) 确保胶原蛋白稀释液均匀地铺在培养表面,室温孵育1小时。小心地吸出溶液,用无菌PBS润洗3-4次,去除残留的乙酸。
(3) 包被好的培养皿可立即使用或晾干后在2-8 ℃储存备用。
表 1 包被液推荐用量表
培养器材 | 培养面积(cm2) | 50 μg/mL包被液添加量(μL) |
96孔板 | 0.32 | 32 |
48孔板 | 0.8 | 80 |
24孔板 | 1.8 | 180 |
12孔板 | 3.5 | 350 |
6孔板 | 9.1 | 910 |
35mm培养皿 | 9 | 900 |
60mm培养皿 | 20 | 2000 |
100mm培养皿 | 57 | 5700 |
150mm培养皿 | 150 | 15000 |
2. 凝胶的制备
(1) 不含细胞的凝胶制备(胶原浓度1 mg/mL,体积1mL)(全程在冰上操作)
a) 将Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型、10×PBS、0.1 M NaOH溶液和纯水置于冰上备用。
b) 准备一支无菌的2 mL 离心管置于冰上,在离心管中依次加入冷却的10×PBS(100 μL)、0.1 M NaOH溶液(40 μL)和纯水(660 μL),充分混合。
c) 将200 μL Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型加入上述混合溶液中,混合均匀(混合过程中应轻柔避免产生气泡)。
d) 将配制好的溶液按照表 2凝胶推荐用量添加到不同培养器材中。
e) 在CO2培养箱中静置孵育10-30 min,待凝胶完全凝固,用PBS或培养基润洗一遍,然后接种细胞。
(2) 含细胞的凝胶制备(胶原浓度1 mg/mL,体积1mL)(全程在冰上操作)
a) 将Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型、10×PBS、0.1 M NaOH溶液和纯水置于冰上备用。
b) 准备一支无菌的2 mL 离心管置于冰上,在离心管中依次加入冷却的10×PBS(50 μL)、0.1 M NaOH溶液(40 μL)和纯水(210 μL),充分混合。
c) 将200 μL Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型加入上述混合溶液中,混合均匀(混合过程中应轻柔避免产生气泡)。
d) 将500 μL细胞悬液加入上述混合溶液中,混合均匀(混合过程中应轻柔避免产生气泡)。
e) 将配制好的溶液按照表 2凝胶推荐用量添加到不同培养器材中。
a) 在CO2培养箱中进行培养。
表 2 凝胶推荐用量表
培养器材 | 培养面积(cm2) | 凝胶体积(μL) |
96孔板 | 0.32 | 100 |
48孔板 | 0.8 | 200 |
24孔板 | 1.8 | 400 |
12孔板 | 3.5 | 800 |
6孔板 | 9.1 | 2000 |
注意事项
1. Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型中和后在室温下会迅速成胶,需全程在冰上操作,尽量保持低温。
2. 请在无菌环境下进行操作,避免污染。
3. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
4. 不同厂商的培养板可能在规格上有差别,请根据实际培养面积与需要进行包被。
5. 由于胶原蛋白黏性高,移液时请使用低吸附枪头或前端较粗的移液管。
6. 鼠尾胶原凝胶制备过程中用到的10×PBS、0.1 M NaOH溶液和纯水需用0.22 μm的滤膜过滤保证无菌。
7. 胶原浓度、pH和离子浓度均能显著影响凝胶的强度,建议使用的凝胶中胶原蛋白浓度不小于1 mg/mL。
本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!
(产品包装升级中,以实物为准。)
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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