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Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型

¥200
货号:Y4151-2ML
品牌:YIKE
规格:
  • 2 mL
数量:

Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型可作为培养上皮细胞、肝细胞和成纤维细胞等细胞的理想底物,用于包被培养皿表面以促进细胞贴壁和增殖,或作为三维培养基质模拟体内细胞外基质环境,为细胞立体生长和组织构建提供支持


产品信息

产品名称

产品编号

规格

Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型

G4140-2ML

2 mL

G4140-20ML

20 mL



产品描述

胶原蛋白I型是人体中最丰富的蛋白质,占总蛋白质的30 %,由不断重复G-X-Y的三条多肽链(两个α1链和一个α2链)组装成一种三链螺旋结构,为骨骼、肌腱、韧带和皮肤等组织提供强度和弹性。胶原蛋白Ⅰ型在细胞生长、分化、附着和细胞迁移中起着关键作用,因此许多体外实验方法,如细胞嵌入胶原蛋白凝胶、水凝胶制备、黏附实验等,已被开发用于研究细胞与细胞外基质相互作用的各个方面。

Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型可作为培养上皮细胞、肝细胞和成纤维细胞等细胞的底物,用于包被培养皿表面或为细胞的三维培养提供基质。

Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型为溶于0.02 M 乙酸,浓度为5 mg/mL的无菌制品。


储存与运输

冰袋运输,2-8 ℃避光保存,12个月有效期;切勿冻存。


产品组成

Component Number

Component

G4140

G4140

Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型

2 mL

20 mL

产品说明书

1 份


产品使用

1. 细胞培养皿的表面包被

可根据不同的实验需求选择蛋白浓度,建议包被浓度为5 μg/cm2

(1) 用0.02 M 乙酸溶液将胶原蛋白稀释至50 μg/mL,参考1 包被液推荐用量表添加到培养器材中。

(2) 确保胶原蛋白稀释液均匀地铺在培养表面,室温孵育1小时。小心地吸出溶液,用无菌PBS润洗3-4次,去除残留的乙酸。

(3) 包被好的培养皿可立即使用或晾干后在2-8 ℃储存备用。

表 1 包被液推荐用量表

培养器材

培养面积(cm2

50 μg/mL包被液添加量(μL)

96孔板

0.32

32

48孔板

0.8

80

24孔板

1.8

180

12孔板

3.5

350

6孔板

9.1

910

35mm培养皿

9

900

60mm培养皿

20

2000

100mm培养皿

57

5700

150mm培养皿

150

15000

2. 凝胶的制备

(1) 不含细胞的凝胶制备(胶原浓度1 mg/mL,体积1mL(全程在冰上操作)

a) 将Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型、10×PBS、0.1 M NaOH溶液和纯水置于冰上备用。

b) 准备一支无菌的2 mL 离心管置于冰上,在离心管中依次加入冷却的10×PBS(100 μL)、0.1 M NaOH溶液(40 μL)和纯水(660 μL),充分混合。

c) 将200 μL Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型加入上述混合溶液中,混合均匀(混合过程中应轻柔避免产生气泡)。

d) 将配制好的溶液按照表 2凝胶推荐用量添加到不同培养器材中。

e) 在CO2培养箱中静置孵育10-30 min,待凝胶完全凝固,用PBS或培养基润洗一遍,然后接种细胞。

(2) 含细胞的凝胶制备(胶原浓度1 mg/mL,体积1mL(全程在冰上操作)

a) 将Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型、10×PBS、0.1 M NaOH溶液和纯水置于冰上备用。

b) 准备一支无菌的2 mL 离心管置于冰上,在离心管中依次加入冷却的10×PBS(50 μL)、0.1 M NaOH溶液(40 μL)和纯水(210 μL),充分混合。

c) 将200 μL Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型加入上述混合溶液中,混合均匀(混合过程中应轻柔避免产生气泡)。

d) 将500 μL细胞悬液加入上述混合溶液中,混合均匀(混合过程中应轻柔避免产生气泡)。

e) 将配制好的溶液按照表 2凝胶推荐用量添加到不同培养器材中。

a) 在CO2培养箱中进行培养。

2 凝胶推荐用量表

培养器材

培养面积(cm2

凝胶体积(μL)

96孔板

0.32

100

48孔板

0.8

200

24孔板

1.8

400

12孔板

3.5

800

6孔板

9.1

2000


注意事项

1. Swe鼠尾胶原蛋白Ⅰ型中和后在室温下会迅速成胶,需全程在冰上操作,尽量保持低温。

2. 请在无菌环境下进行操作,避免污染。

3. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

4. 不同厂商的培养板可能在规格上有差别,请根据实际培养面积与需要进行包被。

5. 由于胶原蛋白黏性高,移液时请使用低吸附枪头或前端较粗的移液管。

6. 鼠尾胶原凝胶制备过程中用到的10×PBS、0.1 M NaOH溶液和纯水需用0.22 μm的滤膜过滤保证无菌。

7. 胶原浓度、pH和离子浓度均能显著影响凝胶的强度,建议使用的凝胶中胶原蛋白浓度不小于1 mg/mL。


本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!



(产品包装升级中,以实物为准。


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注意事项

  • 请在保质期内使用本产品
  • 请存放于阴凉干燥处,避免阳光直射
  • 使用前请仔细阅读产品说明书
  • 如有不适,请立即停止使用并咨询专业人士
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