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尿蛋白定量检测试剂盒(CBB法)

¥132
货号:Y4339-96T
品牌:YIKE
规格:
  • 96 T
数量:

尿蛋白定量检测试剂盒是一种具有操作简便、灵敏度高、特异性强的试剂盒,通过考马斯亮蓝G-250染料与蛋白质结合显色的原理,准确定量检测尿液中蛋白质的含量


产品信息

产品名称

产品编号

规格

尿蛋白定量检测试剂盒(CBB法)

Y4339-48T

48T

Y4339-96T

96T


产品简介

尿内出现蛋白称为蛋白尿,也即尿蛋白,尿蛋白成分较为复杂,主要包括来自血浆的白蛋白(Alb)、IgG、IgA、IgM、轻链(κ、λ)、β2-微球蛋白(β2M)、α1微球蛋白(α1M)、α2巨球蛋白(α2M)、游离血红蛋白(Hb)、肌红蛋白(Mb)、其他血浆蛋白和酶类,以及非血浆蛋白如Tamm-Horsfall蛋白(THP)、肾小球基底膜(GBM)抗原和其他衍生蛋白质。健康成人的尿中可含有少量的蛋白质,一般为40-80 mg/24 h,若尿中蛋白质含量持续>100 mg/L或>150 mg/24 h,则蛋白定性试验呈阳性,即为蛋白尿,尿液内蛋白质含量增加标志着肾小球滤过膜或肾小管发生病变,肾回吸收功能下降,是早期诊断肾损害的重要指标,因此尿蛋白检验对于肾脏疾病、心脑血管疾病、高血压等疾病的诊断和愈后评估具有重要意义。

本产品适用于尿液中蛋白质的含量检测。检测原理:在酸性溶液中,CBB与蛋白质的NH3+基团结合引起颜色反应,呈现蓝色,在595 nm处有最大吸收峰,其吸光度与尿蛋白浓度成正比,因此可用于对样品中尿蛋白的浓度测定。


储存与运输

冰袋(wet ice)运输;2-8℃保存,6个月有效。



组成

Component Number

Component

Y4339-48T

Y4339-96T

Y4339-1

检测液

10 mL

20 mL

Y4339-2

标准品(10 g/L)

1 mL

1 mL

Y4339-3

标准品稀释液

10 mL

10 mL

说明书

1份


操作步骤

1. 样本要求

若尿液澄清可直接测定;若浑浊,4℃,10000 g,离心10 min,取上清检测。

2. 尿蛋白含量测定

2.1. 标准曲线制作(可选)

2.1.1.标准品稀释:使用标准品稀释液,将标准品(10 g/L)梯度稀释成1600、1200、800、400、200、100、50、0 mg/L。

2.1.2.每孔加入5 μL各浓度标准品,检测OD595,各浓度标准品OD595扣除空白后,得△OD595。

2.1.3.以标准品浓度为横坐标x,△OD595为纵坐标y,制作标准曲线y=ax+b。

2.2操作步骤


空白

标准

样本

标准品稀释液

5 μL



标准品(1000 mg/L)


5 μL


样本



5 μL

检测液

200 μL

200 μL

200 μL

混匀,室温孵育5 min,读取595 nm处吸光度值 A

注:采用单孔标准品计算时,选择1000 mg/L浓度标准品。

2.3计算公式

标准孔计算:

样本尿蛋白含量(mg/L)=(A样本-A空白)÷(A标准-A空白)×C标准

注:C标准=1000 mg/L

标准曲线计算:

样本尿蛋白含量(mg/L)=(A样本-A空白-b)÷a


注意事项

1. 检测液使用前需恢复至室温,并颠倒混匀,以免影响检测的灵敏度。

2. 若样本中尿蛋白浓度较高,超过线性范围时,可使用标准品稀释液稀释后再进行检测。

3. 为了您的健康和安全,操作时请穿好实验服、戴好手套。

 附录1技术参数

检测指标

尿蛋白

回收率

100±10%

样品类型

尿液

批内YV

<3%

检测灵敏度及范围

50 mg/L;50-1600 mg/L

批间YV

<5%

附录2标准曲线制作示例(数据仅供参考)

根据说明书信息检测1600、1200、800、400、200、100、50、0 mg/L梯度样本的吸光度结果如下示例:

浓度(mg/L)

0

50

100

200

400

800

1200

1600

OD595

0.404

0.42

0.449

0.504

0.624

0.809

0.97

1.069

△OD595

0

0.016

0.045

0.1

0.22

0.405

0.566

0.665

以样本浓度为横坐标,△OD595结果为纵坐标,得到的标准曲线拟合方程为Y=0.0005X+0.0034,R2=0.9956。


附录3样本检测示例(数据仅供参考)

按照说明书操作测的一例血清样本的OD595为0.812,空白样本的OD546为0.404,计算此样本的△OD595为0.408。采用单孔计算时,根据1000mg/L标准品的△OD595为0.5034,计算血清样本尿蛋白浓度为0.408÷0.5034×1000 =810.5mg/L;采用标准曲线计算时,将此样本的△OD595 0.405代入标准曲线拟合方程,计算出尿蛋白浓度为(0.408-0.0034)÷0.0005=809.2 mg/L


产品仅供科研用途,不用于临床诊断!

(产品包装升级中,以实物为准。


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注意事项

  • 请在保质期内使用本产品
  • 请存放于阴凉干燥处,避免阳光直射
  • 使用前请仔细阅读产品说明书
  • 如有不适,请立即停止使用并咨询专业人士
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