
尿蛋白定量检测试剂盒(CBB法)
- 48 T
尿蛋白定量检测试剂盒是一种具有操作简便、灵敏度高、特异性强的试剂盒,通过考马斯亮蓝G-250染料与蛋白质结合显色的原理,准确定量检测尿液中蛋白质的含量
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 |
尿蛋白定量检测试剂盒(CBB法) | Y4339-48T | 48T |
Y4339-96T | 96T |
产品简介
尿内出现蛋白称为蛋白尿,也即尿蛋白,尿蛋白成分较为复杂,主要包括来自血浆的白蛋白(Alb)、IgG、IgA、IgM、轻链(κ、λ)、β2-微球蛋白(β2M)、α1微球蛋白(α1M)、α2巨球蛋白(α2M)、游离血红蛋白(Hb)、肌红蛋白(Mb)、其他血浆蛋白和酶类,以及非血浆蛋白如Tamm-Horsfall蛋白(THP)、肾小球基底膜(GBM)抗原和其他衍生蛋白质。健康成人的尿中可含有少量的蛋白质,一般为40-80 mg/24 h,若尿中蛋白质含量持续>100 mg/L或>150 mg/24 h,则蛋白定性试验呈阳性,即为蛋白尿,尿液内蛋白质含量增加标志着肾小球滤过膜或肾小管发生病变,肾回吸收功能下降,是早期诊断肾损害的重要指标,因此尿蛋白检验对于肾脏疾病、心脑血管疾病、高血压等疾病的诊断和愈后评估具有重要意义。
本产品适用于尿液中蛋白质的含量检测。检测原理:在酸性溶液中,CBB与蛋白质的NH3+基团结合引起颜色反应,呈现蓝色,在595 nm处有最大吸收峰,其吸光度与尿蛋白浓度成正比,因此可用于对样品中尿蛋白的浓度测定。
储存与运输
冰袋(wet ice)运输;2-8℃保存,6个月有效。
组成
Component Number | Component | Y4339-48T | Y4339-96T |
Y4339-1 | 检测液 | 10 mL | 20 mL |
Y4339-2 | 标准品(10 g/L) | 1 mL | 1 mL |
Y4339-3 | 标准品稀释液 | 10 mL | 10 mL |
说明书 | 1份 | ||
操作步骤
1. 样本要求
若尿液澄清可直接测定;若浑浊,4℃,10000 g,离心10 min,取上清检测。
2. 尿蛋白含量测定
2.1. 标准曲线制作(可选)
2.1.1.标准品稀释:使用标准品稀释液,将标准品(10 g/L)梯度稀释成1600、1200、800、400、200、100、50、0 mg/L。
2.1.2.每孔加入5 μL各浓度标准品,检测OD595,各浓度标准品OD595扣除空白后,得△OD595。
2.1.3.以标准品浓度为横坐标x,△OD595为纵坐标y,制作标准曲线y=ax+b。
2.2操作步骤
空白 | 标准 | 样本 | |
标准品稀释液 | 5 μL | ||
标准品(1000 mg/L) | 5 μL | ||
样本 | 5 μL | ||
检测液 | 200 μL | 200 μL | 200 μL |
混匀,室温孵育5 min,读取595 nm处吸光度值 A | |||
注:采用单孔标准品计算时,选择1000 mg/L浓度标准品。
2.3计算公式
标准孔计算:
样本尿蛋白含量(mg/L)=(A样本-A空白)÷(A标准-A空白)×C标准
注:C标准=1000 mg/L
标准曲线计算:
样本尿蛋白含量(mg/L)=(A样本-A空白-b)÷a
注意事项
1. 检测液使用前需恢复至室温,并颠倒混匀,以免影响检测的灵敏度。
2. 若样本中尿蛋白浓度较高,超过线性范围时,可使用标准品稀释液稀释后再进行检测。
3. 为了您的健康和安全,操作时请穿好实验服、戴好手套。
附录1:技术参数
检测指标 | 尿蛋白 | 回收率 | 100±10% |
样品类型 | 尿液 | 批内YV | <3% |
检测灵敏度及范围 | 50 mg/L;50-1600 mg/L | 批间YV | <5% |
附录2:标准曲线制作示例(数据仅供参考)
根据说明书信息检测1600、1200、800、400、200、100、50、0 mg/L梯度样本的吸光度结果如下示例:
浓度(mg/L) | 0 | 50 | 100 | 200 | 400 | 800 | 1200 | 1600 |
OD595 | 0.404 | 0.42 | 0.449 | 0.504 | 0.624 | 0.809 | 0.97 | 1.069 |
△OD595 | 0 | 0.016 | 0.045 | 0.1 | 0.22 | 0.405 | 0.566 | 0.665 |
以样本浓度为横坐标,△OD595结果为纵坐标,得到的标准曲线拟合方程为Y=0.0005X+0.0034,R2=0.9956。
附录3:样本检测示例(数据仅供参考)
按照说明书操作测的一例血清样本的OD595为0.812,空白样本的OD546为0.404,计算此样本的△OD595为0.408。采用单孔计算时,根据1000mg/L标准品的△OD595为0.5034,计算血清样本尿蛋白浓度为0.408÷0.5034×1000 =810.5mg/L;采用标准曲线计算时,将此样本的△OD595 0.405代入标准曲线拟合方程,计算出尿蛋白浓度为(0.408-0.0034)÷0.0005=809.2 mg/L。
产品仅供科研用途,不用于临床诊断!
(产品包装升级中,以实物为准。)
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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