
植物可溶性糖检测试剂盒(比色法)
- 48 T
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 |
植物可溶性糖检测试剂盒(比色法) | Y4335-48T | 48T |
产品描述
糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一,也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。不同栽培条件,不同成熟度都会影响水果、蔬菜中糖类的含量。因此对水果、蔬菜中可溶性糖的测定,可以了解和鉴定水果、蔬菜的品质。总糖是指样品中的还原单糖及在本法测定条件下能水解成还原单糖的蔗糖、麦芽糖和可部分水解为葡萄糖的淀粉。
糖在浓硫酸作用下,可经脱水反应生成糖醛或羟甲基糖醛,生成的糖醛或羟甲基糖醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物,在一定范围内,颜色的深浅与糖的含量成正比,故可用于糖的定量。本试剂盒采用的蒽酮比色法,可用于植物组织中可溶性单糖、寡糖和多糖的含量测定。
储存与运输
冰袋(wet ice)运输;2~8℃保存,6个月有效。
试剂盒组成
Component Number | Component | G4324-48T |
Y4335-1 | 提取液 | 50 mL |
Y4335-2 | 显色剂(粉末) | 25 mg×2 |
Y4335-3 | 葡萄糖标准品(1 mg/mL) | 1 mL |
说明书 | 1份 | |
操作步骤
1. 样品、试剂准备:
1.1. 样本处理:准确称取植物组织重量(0.05 g~0.1 g),按重量(g):体积(mL)=1:10的比例,加入提取液并进行机械匀浆处理,然后将匀浆液倒入有盖离心管中,沸水浴/金属浴100℃处理10 min(沸水浴可封膜,金属浴可压住管盖,避免加热过程中管盖被冲开)。取出匀浆液冷却后,10000 g离心10 min获取匀浆上清,将上清液稀释10倍后待测。
1.2. 检测工作液配制:每管显色剂粉末加入12.5 mL浓硫酸(自备)溶解,浓度为2 mg/mL。也可少量配制,例如:称量10.8 mg的显色剂粉末,加入5.4 mL浓硫酸。
1.3. 标准品稀释:将1 mg/mL标准品,使用双蒸水稀释为0.1 mg/mL(标准孔计算法);将1 mg/mL标准品,使用双蒸水稀释为0.005,0.01,0.02,0.04,0.08,0.1,0.2 mg/mL(标准曲线计算法)。
2. 糖原浓度检测:
2.1. 按照下表,在离心管中操作
空白孔 | 标准孔 | 样本孔 | |
蒸馏水 | 100 μL | ||
0.1 mg/mL标准品 | 100 μL | ||
样本 | 100 μL | ||
检测工作液 | 200 μL | 200 μL | 200 μL |
混匀后沸水浴5 min,冷却后取出200 μL检测620 nm处吸光值。 | |||
2.2. 浓度计算:
2.2.1. 标准孔计算:
样本中可溶性糖含量(mg/g)=(A样本-A空白)÷(A标准-A空白)×C标准×V样本÷W×f
2.2.2. 标准曲线计算:以标准品浓度为横坐标X,吸光度绝对值OD(标准孔减去空白孔)为纵坐标Y,作标准曲线Y=aX+b。
样本中可溶性糖含量(mg/g)=(A样本-A空白-b)÷a×V样本÷W×f
注:C标准:0.1 mg/mL;V样本:0.1 mL;W:0.1 g;f为测试前植物组织匀浆的稀释倍数,默认为10,随稀释倍数相应调整。
注意事项
1. 注意先加完样本后再加检测工作液,因检测工作液中含有浓硫酸,避免试剂溅出造成危险后果。
2. 显色剂粉末在用浓硫酸溶解后请尽快使用,检测前现配现用。
3. 为了您的健康和安全,操作时请穿好实验服、戴好手套。
附录1:技术参数
检测指标 | 植物可溶性糖 | 回收率 | 100±10% |
样品类型 | 植物组织 | 批内YV | <3% |
检测灵敏度及范围 | 0.005 mg/mL;0.005-0.4 mg/mL | 批间YV | <5% |
附录2:标准曲线制作示例(数据仅供参考)
根据说明书信息检测0.2、0.1、0.08、0.04、0.02、0.01、0.005、0mg/mL梯度样本的吸光度结果如下示例:
浓度(mg/mL) | 0 | 0.005 | 0.01 | 0.02 | 0.04 | 0.08 | 0.1 | 0.2 |
OD620 | 0.101 | 0.1421 | 0.1823 | 0.2682 | 0.4429 | 0.8163 | 1.0088 | 1.8617 |
△OD620 | 0 | 0.0411 | 0.0813 | 0.1672 | 0.3419 | 0.7513 | 0.9078 | 1.7607 |
以样本浓度为横坐标,△OD620结果为纵坐标,得到的标准曲线拟合方程为Y=8.8772X-0.0030,R2=0.9996。
附录3:样本检测示例(数据仅供参考)
按照说明书操作测的一例血清样本的OD620为1.3411,空白样本的OD620为0.1010,计算此样本的△OD620为1.2401。采用单孔计算时,根据0.1 mg/mL标准品的△OD620为0.9078,计算血清样本植物可溶性糖浓度为1.2401÷0.9078×0.1×0.1÷0.1×10=1.366mg/mL;采用标准曲线计算时,将此样本的△OD620 1.2401代入标准曲线拟合方程,计算出植物可溶性糖浓度为(1.2401+0.003)÷8.8772×0.1÷0.1×10=1.400 mg/mL。
本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!
(产品包装升级中,以实物为准。)
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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