产品信息

产品简介

铁是人体必需的微量元素之一，对于维持机体正常生理功能具有重要作用。亚铁离子是血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素及其他酶系统的重要组成成分，可帮助氧的运输并促进脂肪氧化。缺乏铁元素容易造成贫血及代谢紊乱，并影响机体的免疫功能。铁元素过量可能引发或加剧多种慢性病（如糖尿病、心脑血管疾病、神经退行性疾病等）。

Fe²⁺在酸性条件下与显色液作用生成蓝色配合物，在593 nm处有吸收峰，通过测定该波长吸光度即可计算Fe²⁺的含量。

储存与运输

冰袋（wet ice）运输；2~8℃保存，6个月有效期。

组成

操作步骤

1. 样本、试剂准备

1.1血液采集后需及时分离血清或血浆，避免溶血，可立即检测或者-20℃保存待测。

1.2 组织样本：准确称取组织重量，按重量（g）：体积(mL)=1：9的比例，加入9倍体积的提取液，冰水浴条件下机械匀浆，制成10%的匀浆，10000 g，离心10 min，取上清测定（可BCA法测定蛋白浓度）。

1.3 细胞样本：细胞收集后，大约每1×10^6个细胞加300-500 μL提取液进行匀浆；匀浆处理后，4℃，10000 g 离心 10-15 min，取上清用于后续检测（可BCA法测定蛋白浓度）。

1.4 标准品制备与梯度稀释：准确称取27.8 mg标准品溶于10 mL超纯水或双蒸水得到10 mM标准品溶液，梯度稀释为200，100，50，25，12.5，6.25，3.125，0 μmol/L等浓度标准品，用于标准曲线法检测计算；也可稀释为50 μmol/L标准品，用于标准孔法检测计算。

2. 检测步骤

2.1 样本检测（在离心管中操作）

2.2 含量计算

2.2.1标准孔计算法

血清/浆Fe²⁺含量（μmol/L）=（A_样本-A_样本对照）÷（A_标准-A_空白）×C_标准

组织/细胞Fe²⁺含量（μmol/g prot）=（A_样本-A_样本对照）÷（A_标准-A_空白）×C_标准÷Cpr

注：C_标准，50 μmol/L；Cpr：组织(细胞)匀浆蛋白浓度，g prot/L。

2.2.2标准曲线法：以标准品浓度梯度为横坐标x，△OD₅₉₃为纵坐标y，制作标准曲线y=ax+b。

血清/浆Fe²⁺含量（μmol/L）=（A_样本-A_样本对照-b）÷a

组织/细胞Fe²⁺含量（μmol/g prot）=（A_样本-A_样本对照-b）÷a÷Cpr

注：Cpr：组织(细胞)匀浆后蛋白浓度，g prot/L。

注意事项

1. 标准品配制成溶液后，尽量现配现用。

2. 血清及组织块-20℃冷冻后可保存1～2个月。温度越低保存时间越长。2～8℃保存三天。

3. 如果样本检测超过线性范围时，请将样品进行适当的浓缩或稀释，并在计算公式中除以浓缩倍数或者乘以稀释倍数。

4. 为了您的健康和安全，操作时请穿好实验服、戴好手套。

附录1：技术参数

附录2：标准曲线制作示例（数据仅供参考）

根据说明书信息检测200，100，50，25，12.5，6.25，3.125，0 μmol/L梯度样本的吸光度结果如下示例：

以样本浓度为横坐标，△OD₅₉₃结果为纵坐标，得到的标准曲线拟合方程为Y=0.0031X-0.0021，R²=0.9999。

附录3：样本检测示例（数据仅供参考）

按照说明书操作测的一例血清样本的OD₅₉₃为0.232，空白样本的OD₅₉₃为0.050，计算此样本的△OD₅₉₃为0.182。采用单孔计算时，根据50 μmol/L标准品的△OD₅₉₃为0.151，计算血清样本亚铁离子浓度为0.182÷0.151×50 =60.265μmol/L；采用标准曲线计算时，将此样本的△OD₅₉₃ 0.182代入标准曲线拟合方程，计算出亚铁离子浓度为（0.182+0.0021）÷0.0031=59.387 μmol/L。

产品仅供科研用途，不用于临床诊断！

（产品包装升级中，以实物为准。）