产品信息

产品简介

本产品是基于胶体金侧向层析原理，采用竞争法快速检测细胞培养上清、细胞/细菌裂解产物或蛋白纯化产物的Flag标签蛋白的含量，是一种半定量的Flag蛋白检测卡。

本产品主要由样品垫、结合垫、层析膜、吸水纸、背板等结构组成。在层析膜上固定有山羊抗鼠 IgG 多克隆抗体（质控线C）和Flag标签蛋白（检测线T）；在结合垫上固定有胶体金标记的Flag标签抗体。当待测样品滴加到样品垫时，通过毛细作用，液体向结合垫移动。如被检样本中不含Flag标签蛋白时，则结合垫上的金标抗Flag标签抗体与固定在检测线T处的Flag标签蛋白结合形成“Au-抗Flag标签抗体－Flag标签蛋白”复合物，从而在检测线T出现一条红色条带；如被检样本中含有Flag标签蛋白时，则Flag标签蛋白与结合垫上的金标抗Flag标签抗体结合形成“Au-抗Flag标签抗体－Flag标签蛋白”复合物，结合垫上未反应的金标抗Flag标签抗体会与检测线T上的Flag标签蛋白反应，T线出现一条红色条带，随着被检样本中Flag标签蛋白含量的增加，T线显色逐渐减弱，直至完全不显色。无论被检样本中是否存在Flag标签蛋白，结合垫上的金标抗Flag标签抗体都会向上层析至质控线C，与羊抗鼠IgG反应出现一条红色条带。质控线C所呈现的红色条带是判断层析过程是否正常的标准。

储存与运输

常温运输，室温保存，有效期12个月。

组成

操作步骤

1. 打开包装取出检测卡，平放在实验台上；

2. 用微量移液器吸取80~100 µL培养上清、细胞/细菌裂解产物或蛋白纯化后样品，滴加到加样孔中；

3. 静置8~10 min读取结果，15 min后判读结果无效。

结果判断

1. 阴性结果：在可视窗口中，质控线C和检测线T均显色，此时T线显色最深；

2. 阳性结果：质控线C显色，检测线T显色较弱或不显色；

3. 无效结果：质控线C不显色，无论检测线T是否显色，此时需重新检测；

4. 注：样品中不含 Flag-tag蛋白时，检测线T显色最深，随着样品中Flag-tag标签蛋白含量的增加，检测线 T显色逐渐减弱，直至显色消失。

结果展示

取出检测卡，平放在实验桌上，将带Flag标签蛋白用PBS分别稀释成10 μg/mL、20 μg/mL、50 μg/mL，然后各取100 μL的稀释液滴加到加样孔中，静置8 min，观察结果。

Flag-tag快速检测卡（胶体金法）8 min的效果图

灵敏度

最低可检测浓度为20 μg/mL，当样品中Flag-tag蛋白含量低于20 μg/mL时，肉眼不易区分。

注意事项

1. 如果样品的颜色导致背景高，可以使用PBS或者培养基稀释样品再进行层析。

2. 为了结果的准确性，需设立阴性对照和阳性对照，建议对照样品与待测样品为同基质。

3. 该检测试剂卡不建议冻存。

4. 开封后尽快使用。

产品仅供科研用途，不用于临床诊断！

（产品包装升级中，以实物为准。）