规格 S-vision免疫组化试剂盒（抗兔二抗） G1312-100T 100T 产品简介 本试剂盒为高灵敏度的两步法免疫组化试剂盒，适用于一抗来源为兔的抗体的后续显色。试剂盒中酶标二抗由葡聚糖为骨架偶联多个HRP酶分子以及抗体分子组成聚合物,该聚合物增加了二抗的酶标密度，为免疫组织化学和免疫细胞化学染色创建了一个高度灵敏、随时可用、一步到位的非生物素检测系统。对组织的固定方法和固定时间以及切片的存放时间有更宽广的适应性，减少了因为组织收取和处理方法不同所造成的差异性，具有简便、快速、灵敏、重复性好和无生物素干扰等特点。其中二抗试剂是即用型的，不需要稀释来获得最佳染色配比，减少实验操作误差。按照每个样本使用100 μL二抗和显色液，本试剂盒共可以检测100个样本。 储存与运输 冰袋（wet ice）运输；2-8℃保存，12个月有效期。 组成 Component Number Component G 1312-100T G 1312-200T G1312-1 S-vision免疫组化多聚二抗（山羊抗兔），即用型 10 mL 20 mL G1312-2 50×DAB原液 250 μL 250 μL G1312-3 DAB稀释液 12.5 mL 12.5 mL 说明书 1份 染色 操作步骤 1. 使用方法-手工染色 推荐常规免疫组织化学染色流程如下： 步骤 试剂 方案 脱蜡 环保型脱蜡透明液（ 推荐G1128 ） 依次将切片放入环保型脱蜡液Ⅰ10分钟-环保型脱蜡液Ⅱ10分钟-环保型脱蜡液Ⅲ10分钟-无水乙醇Ⅰ5分钟-无水乙醇Ⅱ5分钟-无水乙醇Ⅲ5分钟-蒸馏水洗； 抗原修复 柠檬酸抗原修复缓冲液（ 推荐G1202 ）或EDTA抗原修复缓冲液pH 9.0（ 推荐G1203 ） 微波修复：加热至沸腾后维持98℃以上高温15-20分钟，自然冷却至室温； 高压修复：高压锅内加热至均匀喷气后，计时2分钟。 备注：修复时间同样本固定时间及抗原表位有关，可摸索条件； 阻断内源性过氧化物酶 3% 双氧水 浸泡切片或者滴加至完全覆盖组织，室温孵育10分钟。将玻片置于PBS（pH 7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5分钟； 封闭 牛血清白蛋白BSA（ 推荐GC305010 ） 配制成3% BSA工作液，滴加至完全覆盖组织，室温孵育30分钟； 一抗 商品化一抗 滴加一抗工作液至完全覆盖组织，通常为100 μL，4℃过夜或37℃ 孵育2小时； 二抗 S-vision免疫组化多聚二抗 滴加本产品至完全覆盖组织，通常为100 μL，室温孵育20分钟； 显色 DAB显色试剂（试剂2和3） 试剂2和试剂3按照1:50体积比配制工作液，滴加配制好的DAB工作液至完全覆盖组织，显色5-10分钟； 复染细胞核 苏木素染液（ 推荐：G1004 ） 苏木素分化液（ 推荐：G1039 ） 苏木素返蓝液( 推荐：G1040 ) 苏木素染液染色1-3分钟，水洗， 苏木素分化液分化数秒，水洗， 苏木素返蓝液返蓝1分钟，水洗； 脱水封片 封片胶 75% 酒精5分钟-85% 酒精5分钟-无水乙醇Ⅰ5分钟-无水乙醇Ⅱ5分钟-正丁醇5分钟-二甲苯Ⅰ5分钟，脱水透明，将切片从二甲苯拿出来稍晾干，封片胶封片。 2. 使用方法-组化仪染色： 本方案使用赛维尔 IHC-48组化仪，仅供参考。使用其他组化仪可参考各组化仪使用说明。 步骤 试剂 方案 脱蜡 环保型脱蜡透明液（ 推荐G1128 ） 62℃脱蜡液3分钟，重复3次，无水乙醇洗涤3次，纯水洗涤2次； 抗原修复 组化仪专用修复液，推荐pH 9.0 组化仪专用修复液，100℃ 25分钟，冷却20分钟； 阻断内源性过氧化物酶 3% 双氧水 3% 双氧水，100-150 μL，室温10分钟； 封闭 牛血清白蛋白BSA（ 推荐GC305010 ） 3% BSA工作液，100-150 μL，室温10分钟； 一抗 商品化一抗 一抗工作液，100-150 μL，37℃孵育15-30分钟，PBS洗涤3次； 二抗 S-vision免疫组化多聚二抗 本产品100-150 μL，室温孵育20分钟，PBS洗涤3次； 显色 DAB显色试剂（试剂2和3） 试剂2和试剂3按照1:50体积比配制工作液，DAB显色工作液100-150 μL，显色5-10分钟，纯水洗涤3次； 复染细胞核 Mayer苏木素染液 Mayer苏木素染液染色10分钟，纯水洗涤3次； 脱水封片 封片胶 75% 酒精5分钟-85% 酒精5分钟-无水乙醇Ⅰ5分钟-无水乙醇Ⅱ5分钟-正丁醇5分钟-二甲苯Ⅰ5分钟，脱水透明，将切片从二甲苯拿出来稍晾干，封片胶封片。 注意事项 1. 本产品试剂1为即用型试剂，无需稀释，开瓶即用。试剂2和3按照体积比1:50稀释。 2. 若出现背景着色深的结果，可对一抗进行梯度稀释，容易获得更佳的结果。 3. 本试剂盒的使用数量是按照手工染色方式计算的，如果使用组化仪需根据仪器步骤自行计算各组分的用量比例或直接购买组化仪专用试剂套装。 4. 操作时请戴上一次性防护手套。 产品仅供科研用途，不用于临床诊断！