规格 Recombinant HRV 3C Protease (His-tag) G3410-1000U 1000U 产品简介 本产品Recombinant HRV 3C Protease (Human Rhinovirus 3C Protease，PreScission Protease)是在大肠杆菌中重组表达带His标签（His-tag）的人鼻病毒14型3C蛋白酶(Human Rhinovirus type 14 3C Protease)，是一种常用的半胱氨酸蛋白酶，能在低温条件下特异性地识别八肽序列L-E-V-L-F-Q-G-P (Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro)或者核心五肽序列L-F-Q-G-P (Leu-Phe-Gln-Gly-Pro)，并在Q (Gln)与G-P (Gly-Pro)氨基酸残基之间进行酶切。酶的特异性强、活性高，即使在4℃低温条件下依然有很高的酶活性。 应用： 常用于去除融合蛋白中MBP、GST、His或其他标签蛋白。蛋白酶本身带有His标签可以与镍柱结合。 来源： 人鼻病毒14型3C蛋白酶(Human Rhinovirus type 14 3C Protease)，大肠杆菌重组表达，含His标签。 酶活定义： 在4℃，pH 7.5条件下，16 h内可以将100 μg底物（含有HRV 3C Protease酶切位点的蛋白）切割90%以上所需酶量为一个酶活单位。 失活或抑制： 100 mM ZnCl 2 、4 mM AEBSF、100 μM Chymostatin都会抑制HRV 3C Protease的活性。 纯度及浓度： SDS-PAGE检测纯度≥95%，2 U/μL。 Recombinant HRV 3C Protease储存液 ：50 mM Tris-HCl，150 mM NaCl，1 mM EDTA，1 mM DTT，50% (v/v) glycerol，pH 8.0。 10×HRV 3C Buffer ：500 mM Tris-HCl，1.5 M NaCl，10 mM EDTA，10 mM DTT，pH 7.5。 储存与运输 冰袋（wet ice）运输；-20℃保存，12个月有效。 组成 Component Number Component G 3410-1000U G3410-1 Recombinant HRV 3C Protease (His-tag) (2 U/μL) 500 μL G3410-2 10×HRV 3C Buffer 3×1 mL G3410-3 Control Protein 100 μL 产品说明书 1份 操作 步骤 1. 蛋白酶切体系推荐： Component Volume 10×HRV 3C Buffer 5 μL 目的蛋白 200 μg Recombinant HRV 3C Protease (His-tag) (2U/μL) 1 μL ddH 2 O To 50 μL 2. 将上述反应体系置于4℃反应过夜或16 h； 3. 取酶切产物10 μL样品进行SDS-PAGE电泳检测，可以评估酶切用量和反应条件。 注意事项 1. 酶制品使用时应放在冰盒内或冰浴，使用完毕后应立即放置于-20℃保存，建议分装保存； 2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 酶切应用实例 图1：Recombinant HRV 3C Protease酶切对照底物蛋白（A+B融合蛋白，其中含有HRV 3C Protease酶切位点）效果图（酶切条件30℃、pH 7.5，分别酶切0 min、10 min、20 min、30 min、1 h、2 h，依次对应泳道Lane：1-6，酶切体系中加入底物与酶质量比为10：1） 产品仅供科研用途，不用于临床诊断！ （产品包装升级中，以实物为准。 ）