规格 琼脂糖环氧基活化磁珠（SweMagrose Epoxy-Activated） G3653-1ML 1 mL G3653-5ML 5 mL 产品简介 本产品是一种环氧活化的琼脂糖磁珠，主要用于含氨基、巯基和羟基的蛋白或多肽等生物分子固定，也能与有机小分子等进行高效偶联反应。预活化磁珠可以根据需要制备成特殊的亲和介质，配合自动化纯化仪可进行快速高通量蛋白纯化。 产品信息 产品 类型 SweMagrose Epoxy-Activated 磁核 Fe 3 O 4 壳层 琼脂糖 磁性类型 超顺磁性 平均粒径 30~150 μm 表面环氧基含量 >40 μmol/mL gel 保存液 无水1,4-二氧六环 储存与运输 常温运输；2-8℃保存，12个月有效期。 组成 Component Number Component G3653-1 M L G3653-5 M L G3653 琼脂糖环氧基活化磁珠（SweMagrose Epoxy-Activated） 1 mL 5 mL 说明书 1份 操作步骤 （以偶联蛋白为例） A. 自配试剂准备： 所用水和缓冲液在使用之前建议用0.45μm滤膜过滤，推荐赛维尔自产实验室专用纯水（货号：G4701）； 偶联液：0.1 M Na 2 CO 3 ,pH8.5-10.0； 封闭液：1 M 乙醇胺，pH8.0 清洗液1：0.1 M 乙酸-乙酸钠，0.5 M NaCl，pH3.0 清洗液2：0.1 M Tris-HCl，0.5 M NaCl，pH8.0 保护液：含20%乙醇的1×PBS 备注：以上试剂可根据客户实际需求进行调整，偶联液需采用碱性Buffer，且不含氨基成分 B. 反应前准备： a) 待偶联蛋白用偶联液溶解或透析，浓度不低于3mg/mL； b) 取适量的琼脂糖环氧基活化磁珠（SweMagrose Epoxy Activated），磁吸去除保护液，纯水清洗三次，偶联液清洗一次，去除上清备用，碱性环境中环氧基不稳定，建议立即进行偶联； C. 磁珠与生物配体的共价偶联： a) 将溶解好的样本加入到去除上清的磁珠中，磁珠：样品溶液体积比约为1：1-2； b) 37℃偶联3 h或25℃偶联24 h（反应温度与时间可根据实际条件确定，理论上增加偶联温度延长反应时间可增强偶联效率），偶联期间保持磁珠的悬浮状态（可利用垂直混合仪进行颠倒混匀）； c) 反应完毕后收集偶联样品，以便检测偶联效率，偶联液清洗一遍； d) 加入磁珠等体积的封闭液，37℃反应1 h封闭磁珠表面未反应的活化基团，该期间保持磁珠的悬浮状态（可利用垂直混合仪进行颠倒混匀）； e) 反应完毕后用纯水清洗磁珠，清洗液1、去离子水、清洗液2和去离子水重复冲洗2次，然后保存在等体积的保护液中，于1-8℃保存，后续可进行下游应用。 注意事项 1. 冷冻、干燥和高速离心等操作会引起磁珠团聚，不易于重悬和分散，并且影响表面功能基团的化学活性，离心转速不要超过8000rpm，离心时间不要超过5min。 2. 本产品保存在100%1,4-二氧六环中，使用前用纯水或缓冲液洗涤2-3次，以去除保存液中的1,4-二氧六环。 3. 在偶联过程中保证磁珠悬浮，否则会影响偶联效率。 4. 使用时需选择配套磁分离架。 产品仅供科研用途，不用于临床诊断！