规格 NADH-TR肌纤维分型染色试剂盒 G1096-50T 50 T 产品简介 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸四唑氧化还原酶 （NADH-TR）主要 位于I型、II型肌纤维内膜的脂质双分子层中 （ 主要为 线粒体和肌质网 ）， 为有氧代谢电子传递链中的一个酶，其含量的多少可反映三羧酸循环细胞色素系统和其他氧化代谢途径的利用情况。本试剂盒染色原理是以NADH及无色的四唑盐为底物，组织中的NADH-TR将其氧化还原成不溶性的蓝紫色物质，在肌原纤维的线粒体上沉积下来，使线粒体染成蓝紫色，而肌原纤维上的肌动蛋白与肌球蛋白不着色。 I型肌纤维（慢缩肌纤维）的氧化酶含量高于II型肌纤维（快缩肌纤维） ， 因此在 NADH-TR染色后，I型肌纤维呈深蓝紫色， 而II型肌纤维根据其亚型不同，染色深浅也有所不同，IIa型呈现蓝紫色，IIb型呈现淡蓝紫色 。 储存与运输 4℃避光保存与运输，6个月有效期。 组成 Component Number Component G 1 096 - 50 T G1096-1 NADH-TR染色试剂盒底物A 4×4 mg G1096-2 NADH-TR染色试剂盒B液 20 mL G1096-3 NADH-TR染色试剂盒底物C 4×5 mg G1096-4 NADH-TR染色试剂盒D液 2mL 说明书 1份 实验前准备 配制 储备 液： 储备液I液：取5 mL B液加入到一支4 mg 底物A中，充分溶解混匀即为储备液I液； 储备液II液：取500 μ L D液加入到一支5 mg 底物C中，充分溶解混匀即为储备液II液； 将以上储备液分别分装至1.5 mL洁净离心管中，可-20℃避光保存 60天，使用过程中避免反复冻融。 配制 NADH-TR 染色工作液： 请按照以下比例，配制 NADH-TR染色工作液，建议现配现用。 NADH-TR染色工作液配制量（mL） 5 mL体系 10 mL体系 储备液I液 5 mL 10 mL 储备液II液 500 μL 1 mL 新鲜冷冻组织冰冻切片染色 操作步骤 （ 供参考 ） 1、切片处理：冰冻切片室温复温20 min左右之后，纯水浸泡5-10 min，去除OCT包埋剂。 2、画圈：用免疫组化笔（G6100）沿组织周围画圈，减少试剂用量且将组织圈住防止试剂流失。 3、孵育染色液：将切片平放于湿盒中（SIB-20F），在圈内滴加NADH-TR染色工作液完全覆盖组织，水平置于37℃恒温恒湿箱内避光孵育30 min，湿盒底部加入少量纯水保持湿润。 4、水洗：倾去染液，蒸馏水洗1 min。 5、脱水透明封片：切片依次经90%、95%、100%乙醇脱水，各3 min，二甲苯透明5 min，中性树胶封片。 染色结果 Ⅰ型肌纤维 深蓝紫色 ，Ⅱ型肌纤维 IIa型呈蓝紫色 ， IIb型呈淡蓝紫色 。 注意事项 1、本染色液适用于新鲜冷冻组织冰冻切片，同时应减少切片在室温暴露的时间。 2、本实验酶反应的最适温度为37℃，染色时注意染色温度的准确性。 结果展示 小鼠 肌肉 100× 小鼠 肌肉 200× 产品仅供科研用途，不用于临床诊断！ （产品包装升级中，以实物为准。 ）