项目介绍 ： 免疫电镜是利用抗原抗体特异性结合原理，在一张超薄切片（镍网）上，用特异性一抗与待检测抗原结合，然后用带有胶体金标记的二抗与一抗抗原复合物结合。在电子显微镜下胶体金为黑色颗粒状物质，在组织和细胞超微结构上清楚定位抗原，实现蛋白于亚细胞水平的定位，如线粒体、内质网等。 样本准备： 将可孵育抗体的超薄切片，捞于镍网，干燥后送样。 实验步骤： 免疫 标记 ： ①复温水合：镍网从 4℃ 取出用超纯水悬浮5min； ②清洗：TBS室温清洗3 次，每次 5min； ③封闭：1%BSA/TBS的封闭液室温封闭30min； ④加一抗：抗体与封闭液按一定稀释比稀释后4℃过夜孵育； ⑤清洗：室温复温后，TBS清洗3 次，每次 5min； ⑥加二抗：二抗与二抗稀释液按一定稀释比稀释，先室温孵育20min，后转37℃烘箱孵育1h，然后转室温复温0.5h。实验过程中防止干片。 ⑦清洗：TBS 清洗 5次，每次 5min后，超纯水清洗 5次，每次 5min。 ⑧铀复染： 镍 网于 2%醋酸铀饱和酒精溶液 避光染色 8 min ； 70%酒精清洗 3次；超纯水清洗3次 。 ⑨ 烘干：清洗后的镍网用滤纸吸干后放入网板中，37℃烘箱放置10min 烘干备用 。 备注： 1、Servicebio抗体请到官网查询antibody。如果公司无抗体，需要客户自己提供抗体。市面上抗体大多未进行免疫电镜标记验证，标记效果不确定。未标记成功收取一半费用。 2、如果客户使用本公司一抗，需额外收取一抗抗体使用费100元/张。 效果展示： （以下为标注图，最终结果无结构标注，如有需要可联系销售开具标注分析项目） 仅供科研用途，不可用于临床诊断！