游离脂肪酸 NEFA
¥20
货号:YM1153
品牌:YIKE
规格:
- 反应
数量:
服务介绍: 游离脂肪酸(Non-esterifiedfatty acids,NEFA)是中性脂肪分解后的产物之一。当肌肉活动所需能源——肝糖耗尽时,脂肪组织会分解中性脂肪成为游离脂肪酸来充当能源使用。所以,游离脂肪酸可被认为是进行持久活动所需的物质。 货号 名称 规格 价格(元) GM1142 游离脂肪酸NEFA 反应 20 实验结果展示: 实验流程(具体步骤以说明书为准) 1.样品准备 血清,血浆样本,透明液体状样本、组织,细胞等 2.检测前准备 处理样本,配制试剂 3.检测步骤 加样-加试剂-显色反应后酶标仪读数 4.实验结果 样本OD值代入公式计算出结果,以EXCEL形式发出 送样运输要求 1、血清样本(干冰运输) 全血标本加到促凝管(黄色管盖, QX0028 )或者无菌无酶的EP管( EP-150X-J )中室温静置2小时后于2-8℃ 3000rpm/min离心15min,取上清放于-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。样本量不低于5μL。 2、血浆样本(干冰运输) 全血样本置于肝素抗凝管内(绿色管盖, QX0012 ),采血量为抗凝管标注体积的80%-100%,血量勿超过抗凝管标注体积否则抗凝效果不佳,血量不少于80%标注体积,否则样本会被抗凝剂稀释。轻轻颠倒混匀,30分钟内于2-8℃ 3000rpm/min离心15min,取上清放于-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。样本量不低于5μL。 3、动植物组织样本(干冰运输) ①动物处死后5min内取样,全程冰上操作,先取易降解的组织,如胰腺、肠、胃等,再取其它组织,组织块至少取50mg以上(黄豆大小)。组织取好后用预冷的PBS轻轻漂洗掉样本表面的血污,例如心、肝、脾、肾等血污较多的组织,可用预冷PBS清洗多次,直至血污清洗干净,用滤纸吸干组织表面液体,立即放入EP管或冻存管中-80℃保存。 ②肠,胃,血管,食管,子宫等标本,取材后立即把组织切开用预冷PBS清洗多次,去除内容物,用滤纸吸干组织表面液体,立即放入EP管或冻存管中-80℃保存。 ③刚孵化的斑马鱼离心后至少提供黄豆大小的数量。 ④视网膜需单独剥离,小鼠至少需要4个视网膜合并,大鼠至少需要2个视网膜合并。 ⑤皮肤样本需去净毛发。 ⑥根据实验目的选择植物的不同部位(如叶片、根、茎、种子等),尽量选择生长状态一致的样本。采集样本后,用湿布轻轻去除表面污垢,注意不要破坏细胞结构,用无菌吸水纸轻轻吸去水分,避免样本变质。 如有特殊特定部位请提供详细取材要求或参考图。 4、细胞样本(细胞量至少10 7 ,细胞沉淀黄豆大小)、细菌样本(干冰运输) 贴壁细胞: ①培养好的细胞弃培养基,加入PBS,用细胞刮沿一个方向轻轻刮下细胞,切记不要反复刮,避免细胞刮破。 ②细胞液收集至离心管内,4℃低速离心(不超过3000rpm)5min,去上清,收集细胞沉淀,细胞沉淀要有黄豆大小。 悬浮细胞: ①将细胞及培养基一起吸入离心管中,4℃低速离心(不超过3000rpm)5 min,去上清,收集细胞沉淀。 ②加入1mL PBS溶液重悬细胞,将细胞转移到1.5mL离心管中,4℃低速离心(不超过3000rpm)5min,去上清,收集细胞沉淀,细胞沉淀要有黄豆大小。 细胞上清:取细胞培养基于2-8℃,3000rpm离心15min取上清,于-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。样本量不低于5μL。 细菌样本:将培养液4°C,3000rpm离心10分钟,去除上清液,保留菌体。用磷酸缓冲液(PBS)洗涤菌体2-3次,去除残留的培养基,收集沉淀,细菌沉淀黄豆大小。 备注: 1.不要寄送培养板或培养瓶,运输过程中细胞容易脱落且造成细胞活力下降,培养板有漏液风险,造成样本污染。 2.有单独需要加试剂处理细胞的指标检测,如ATP( G4309 ),T-GSH/GSSG( G4304 ),需要先进行细胞计数再收集沉淀,细胞数目备注在实验交接单上。 仅供科研用途,不可用于临床诊断!
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