服务介绍： 组织切片及细胞涂片经吉姆萨染色后，各类细胞由于其成份的差异而呈现出不同的着色，从而达到分辨各类细胞的目的。本项目为改良吉姆萨染色，适用于血涂片，肺泡灌洗液细胞滴片，骨髓细胞涂片，石蜡切片和冰冻切片的染色，染色目的多为观察各类炎性细胞的特征及数量分布。 实验结果展示： 小鼠肺泡灌洗液涂片，未裂解红细胞 实验流程： 涂片/组织切片-改良吉姆萨染色-脱水封片-显微镜镜检 结果判读： 细胞类型 细胞特征及染色结果 成熟红细胞 圆饼状，粉红色，无核 中性粒细胞 细胞核蓝色，呈马蹄形，杆状或分叶形；胞质淡紫红色 嗜酸性颗粒 细胞核蓝色，呈马蹄形，杆状或分叶形；胞质内深红色颗粒 嗜碱性粒细胞 细胞核蓝色，呈马蹄形，杆状或分叶形；胞质内蓝紫色颗粒 淋巴细胞 细胞较小，核蓝色小而圆；细胞质较少呈蓝紫色 单核细胞/巨噬细胞 细胞较大，细胞核蓝色大而圆；细胞质浅蓝紫色 样本准备方法及送样运输要求 （为保证染色成功率，血液、肺泡灌洗液建议客户按以下方法自行涂片固定后送样）： 1.涂片的制作方法： 1.1 血涂片制备： （1）取新鲜血液（若用抗凝管收集的血液，放置最好不要超过24 h，否则血液中白细胞的数量以及种类会明显减少），选用干净的粘附玻片，用移液枪吸取10 μL的血液，滴加在玻片的一侧（一般为磨砂对侧）。 （2）再取一片辅助玻片（也可选用盖玻片，依据个人手的力道习惯选择），以45°角将其宽边靠近血液，血液沿着接触边缘向两边晕开，当两边都到达边缘时，轻轻地稳健且匀速地推向磨砂面一侧，进行涂片，然后快速果断地拿走载玻片，可见涂片首尾分明，厚薄均匀。（一般在保证涂抹速度力道适中的情况下，取走辅助玻片时载玻片上的血几乎无残留，且涂抹出的血涂片细胞无明显破碎、变形。在显微镜下可观察到细胞呈单个紧密排列，整体比较均匀。） （3）自然晾干后，用甲醇浸泡固定15 min，自然晾干后4℃保存运输。 1.2 肺泡灌洗液涂片制备： （1）取肺泡灌洗液悬液1500 rpm 4℃离心10 min去上清。 a、若肉眼观察无明显细胞沉淀，弃上清留离心管底部少量液体直接加入50 μL卡诺氏固定液 轻柔 吹打重悬、室温固定15 min，固定过程中可晃动离心管，避免细胞沉淀沉降 离心管底部导致固定不充分 ， 固定后 用移液 枪吹打混 匀，涂于粘附载玻片上提前用组化笔画好的小圆圈中 （ 3 cm×2 cm的椭圆 ） ； b、若细胞沉淀量很多，黄豆大小或更大， 弃上清后 加入500 μL卡诺氏固定液固定细胞 沉淀 15 min，固定过程中可晃动离心管，避免细胞沉淀沉降 离心管底部导致固定不充分 ，固定后 的细胞沉淀 1500 rpm 离心5 min弃固定液，用PBS或生理盐水重新重悬细胞沉淀，取200 μL 悬液 ，涂于粘附载玻片上提前用组化笔画好的大圆圈中（最大长边约5 cm，最大短边约2 cm的椭圆）。在显微镜下观察细胞量的多少，若还是过厚，再用PBS对倍稀释该细胞悬液，直至在显微镜下观察到细胞量涂布均匀。 （2）用移液枪将细胞悬液铺满整个组化笔圈内，涂片放置自然晾干 （不可通过烘箱加快晾干）。 （3）将晾干后的涂片，自然风干，4℃保存运输。 2. 石蜡切片常温运输，冰冻切片-20℃运输。 样本种类 预处理过程 固定条件 保存运输条件 备注 血液 5-10 μL 血液涂片 甲醇固定15 min后自然晾干 4℃保存运输 血液要用EDTA抗凝管采集，新鲜血液需取血后立即涂片固定。 肺泡灌洗液 50-150 μL细胞悬浮液涂片 卡诺氏固定液固定15 min后自然晾干 4℃保存运输 肺泡灌洗液取样时，灌洗动作要轻柔，不能使肺脏出血，灌洗力度过大会造成一部分细胞形态破裂。 3. 骨髓细胞样本、细胞涂片样本需要客户自行制作涂片，涂片后甲醇固定15 min，自然干燥后，将晾干的涂片，4℃保存运输。（细胞样本1000rpm离心5 min后进行涂片） 仅供科研用途，不可用于临床诊断！