产品信息

产品描述

DNase I（Deoxyribonuclease I，脱氧核糖核酸酶 I）是一种核酸内切酶，可以将单链、双链DNA降解为5'-磷酸、3'-羟基末端的单脱氧核苷酸或者寡核苷酸；DNase I的活性依赖钙离子，能够被镁离子和二价锰离子激活；镁离子存在条件下，DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点；二价锰离子存在条件下，DNase I可在同一位点剪切DNA双链，形成平末端，或1-2个核苷酸突出的粘末端。

主要用途：制备不含DNA的RNA样品；

RT-YCR反应前RNA样品中基因组DNA残留去除；

体外T7，T3，SP6等RNA Polymerases催化的RNA转录后体系中DNA模板去除；

缺口平移（nick translationin）DNA标记；

产生DNA随机片段文库；

细胞凋亡Tunel检测中部分剪切基因组DNA作为实验阳性对照等。

特点：特异性降解DNA，不降解RNA。

酶活性定义：在37℃孵育10 min将1 µg pBR322载体DNA全部降解所需酶量定义为一个酶活单位。

失活或抑制：加入EDTA后，65℃加热10 min可使DNase I充分失活，酚氯仿抽提也可使DNase I失活。

纯度：SDS-PAGE检测纯度≥95%，无RNase，1 U/μL。

酶储存缓冲液：10 mM Tris-HCl，2 mM CaCl₂，50% Glycerol，pH 7.6。

10×DNase I Reaction Buffer：100 mM Tris-HCl，25 mM MgCl₂，5 mM CaCl₂，pH 7.6。

储存与运输

冰袋（wet ice）运输；-20℃保存，有效期12个月。

组成

参考使用

1. 参考反应体系：

2. 配制反应完成后，轻轻混匀，随后将液体离心至管底；

3. 37℃孵育30 min，反应完后在反应体系中加入1 μL 25 mM EDTA终止反应；

4. 65℃孵育10 min使DNase I完全失活。

注意事项

1. 使用该产品时应将酶置于冰盒或冰浴中，使用完毕后立即于-20℃保存。

2. DNase I反应体系可参考实验需求以及实际应用产品相应使用说明调整。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！