产品信息

产品简介

本试剂盒设计用于快速、便捷的从血清、血浆、尿液、细胞培养液上清、病毒原液及感染病毒的组织中分离各种病毒DNA/RNA。本产品通过利用核酸吸附柱可逆的结合核酸的特性，再搭配专门的缓冲体系，允许核酸特异的与膜基质结合，蛋白、细胞碎片以及其他污染物被有效漂洗，最终用Nuclease-free Water将核酸从吸附柱上洗脱下来。得到的高质量的DNA/RNA可直接进行下游YCR、cDNA合成、RT-qYCR等分子生物学实验。

储存与运输

Proteinase K和Carrier RNA冰袋（wet ice）运输，-20℃保存；其余试剂室温运输，室温储存；有效期12个月。

组成

使用前须知（请仔细阅读）

1. Buffer VLB和Buffer VWA如有沉淀现象，请于37℃加热溶解，待恢复室温后适用。

2. 首次使用前请向Buffer VWA中加入18 mL的无水乙醇，Buffer VWB中加入60 mL的无水乙醇。

3. 首次使用前可先将Carrier RNA分装后于-20℃保存，应避免反复冻融。

4. 使用组织研磨仪时，提前将研磨仪预冷。

操作步骤

1. 病毒样本的处理：

a. 血清、血浆、尿液、细胞培养液上清和病毒原液的裂解：取10-200 μL的血清、血浆、尿液、细胞培养液上清或病毒原液，起始量不足200 μL可用PBS或Nuclease-free Water补至200 μL。

b. 感染病毒的组织裂解：取10-20 mg新鲜或超低温冻存的感染病毒的组织，置于装有2-3颗3 mm研磨珠（推荐Y0214）的1.5 mL Nuclease-free离心管或专用研磨管（推荐YT-200-M）中，立刻将装有组织的离心管或研磨管置于液氮中，随后使用组织研磨仪（推荐YWE-3D）在低温条件下将组织彻底研磨至匀浆状（如果组织没有被彻底匀浆，将会影响DNA/RNA的得率和质量），研磨后加入200 μL的PBS或Nuclease-free Water。

2. 加入200 μL Buffer VLB，20 μL Proteinase K和3 μL Carrier RNA，充分混匀后于56℃孵育10 min;

3. 加入200 μL无水乙醇，上下颠倒混匀；

4. 将上一步的溶液转移至Spin Column中，12,000 rpm 离心1 min，弃掉Collection tube中滤液；

5. 向Spin Column中加入500 μL的Buffer VWA（使用前请确认已添加无水乙醇），12,000 rpm离心1 min，弃掉Collection tube中的滤液；

6. 向Spin Column中加入700 μL Buffer VWB（使用前请确认已添加无水乙醇，请沿Spin Column管壁加入Buffer VWB，有助于冲洗管壁上残留的盐分），12,000 rpm离心30 s，弃掉废液；

7. 重复操作步骤6;

8. 将Spin Column置于Collection tube上，12,000 rpm离心2 min；

9. 将Spin Column转移至新的Nuclease-free 1.5 mL离心管中，开盖室温静置3-5 min，使Spin Column残留的乙醇完全挥发；

10. 向Spin Column中央加入30-50 μL的Nuclease-free Water，室温静置5 min，12,000 rpm，室温离心2 min洗脱DNA/RNA。若要得到更高浓度的DNA/RNA，也可以将第一次的洗脱液重新加回至Spin Column中，室温静置5 min，12,000 rpm，室温离心2 min，再次收集DNA/RNA。

注意事项

1. 操作之前，请务必认真阅读本产品说明书。

2. 由于提取过程中加入了Carrier RNA，不能通过电泳或吸光度计测定定量。

3. 本试剂盒提供的Carrier RNA是大肠杆菌来源的RNA，主要是为了提高微量核酸的回收效率与防止得到的微量RNA被降解，如果YCR扩增引物与Carrier RNA具有较高同源性时，可重新设计引物。

4. 洗脱前，应使乙醇完全挥发，避免残留的乙醇影响下游实验。

5. 请勿长时间干燥，以免影响核酸洗脱效率。

6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！

附操作流程简图

（产品包装升级中，以实物为准。）