产品信息

产品简介

本试剂盒设计用于从血清、血浆、尿液、细胞培养液上清、病毒原液及感染病毒的组织中快速分离各种病毒DNA/RNA。通过本公司自主研发的超顺磁性磁珠，在特殊的缓冲体系作用下，核酸特异的吸附于磁性粒子表面，蛋白、细胞碎片以及其他污染物可有效的被漂洗，最后用Nuclease-free Water洗脱得到高质量的DNA/RNA。得到的高质量DNA/RNA可直接进行下游YCR、cDNA合成、RT-qYCR等分子生物学实验。

储存与运输

Proteinase K和Carrier RNA冰袋（wet ice）运输，-20℃保存；其余试剂室温运输，室温储存；有效期12个月。

组成

使用前须知（请仔细阅读）

1. Buffer MVL和Buffer MPA如有沉淀现象，请于37℃加热溶解，待恢复室温后使用。

2. 首次使用前请向Buffer MPA中加入18 mL的无水乙醇，Buffer MPB中加入60 mL的无水乙醇。

3. 首次使用前可先将Carrier RNA分装后于-20℃保存，应避免反复冻融。

4. 使用组织研磨仪时，提前将研磨仪预冷。

5. 自备磁力架。

操作步骤

1. 病毒样本的处理：

a. 血清、血浆、尿液、细胞培养液上清和病毒原液的裂解：取10-200 μL的血清、血浆、尿液、细胞培养液上清或病毒原液，起始量不足200 μL可用PBS或Nuclease-free Water补至200 μL。

b. 感染病毒的组织裂解：取10-20 mg新鲜或超低温冻存的感染病毒的组织，置于装有2-3颗3 mm研磨珠（推荐Y0214）的1.5 mL Nuclease-free离心管或专用研磨管（推荐YT-200-M）中，立刻将装有组织的离心管或研磨管置于液氮中，随后使用组织研磨仪（推荐YWE-3D）在低温条件下将组织彻底研磨至匀浆状（如果组织没有被彻底匀浆，将会影响DNA/RNA的得率和质量），研磨后加入200 μL的PBS或Nuclease-free Water。

2. 加入200 μL Buffer MVL，20 μL Proteinase K和1 μL Carrier RNA，充分混匀后于56℃孵育10 min;

3. 加入200 μL无水乙醇，颠倒混匀，再加入20 μL SweMag Beads（SweMag Beads使用前需涡旋至分散均匀），上下颠倒数次，至磁珠分散均匀；

4. 室温放置10 min，期间使用移液器或涡旋仪混匀2-3次，至磁珠分散均匀；

5. 将离心管移至磁力架上静置30 s，直至磁珠完全吸附，将离心管随磁力架温和地上下颠倒数次，使管壁残留的磁珠冲刷下来，待上清清澈后，吸弃上清（为避免影响提取效率，请勿将磁珠吸出）；

6. 移开磁力架，加入500 μL Buffer MPA（使用前请确认已添加无水乙醇），使用移液器轻轻吹打至磁珠分散均匀，将离心管移至磁力架上静置30 s，再将离心管随磁力架温和地上下颠倒数次，使管壁残留的磁珠和盐分冲刷下来，待上清清澈后，吸弃上清（为避免影响提取效率，请务必吸尽离心管内残留的液体）；

7. 移开磁力架，加入700 μL Buffer MPB（使用前请确认已添加无水乙醇），使用移液器轻轻吹打至磁珠分散均匀，将离心管移至磁力架上静置30 s，再将离心管随磁力架温和地上下颠倒数次，使管壁残留的磁珠和盐分冲刷下来，待上清清澈后，吸弃上清（为避免影响提取效率，请务必吸尽离心管内残留的液体）；

8. 重复操作步骤7；

9. 将离心管盖打开，室温放置5–10 min，使乙醇完全挥发（避免磁珠过度干燥，以免影响核酸得率）；

10. 移开磁力架，向离心管中加入50-80 μL Nuclease-free Water，用移液器轻轻吹打至磁珠分散均匀，室温静置3 min；

11. 将离心管置于磁力架上，直至磁珠完全吸附，吸取上清至一新的Nuclease-free离心管中，即得高纯度的DNA/RNA。

注意事项

1. 操作之前，请务必认真阅读本产品说明书。

2. 由于提取过程中加入了Carrier RNA，不能通过电泳或吸光度计测定定量。

3. 本试剂盒提供的Carrier RNA是大肠杆菌来源的RNA，主要是为了提高微量核酸的回收效率与防止得到的微量RNA被降解，如果YCR扩增引物与Carrier RNA具有较高同源性时，可重新设计引物。

4. 磁珠易沉淀，使用前应涡旋至磁珠分散均匀。

5. 磁珠悬液在保存过程中避免冷冻。

6. 向样本中加入磁珠前，需要将样本与其他试剂混合均匀。

7. 洗脱前，应使乙醇完全挥发，避免残留的乙醇影响下游实验。

8. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！

附操作流程简图

（产品包装升级中，以实物为准。）