产品信息

产品简介

本试剂盒能从多类土壤环境样本中纯化总DNA。高效的裂解缓冲体系搭配研磨珠，可有效处理真菌、细菌等土壤中的各类微生物。独特的腐殖酸去除剂，可去除土壤样本中的腐殖酸和其他抑制因子。优化的缓冲系统可使核酸高效结合到吸附柱上，能够从100-300 mg土壤样本中快速、可靠地分离高质量完整的基因组DNA，纯化后的DNA适用于YCR、酶切和杂交等下游分子生物学实验。

储存与运输

Proteinase K冰袋（wet ice）运输，-20℃保存；其余试剂室温运输，室温储存；有效期12个月。

组成

使用前须知（请仔细阅读）

1. 若Buffer SA1、Buffer SLB、Buffer SGB、Buffer SD出现沉淀，请于60℃加热溶解，待恢复至室温后使用。

2. 使用前请向Buffer YP中加入21 mL无水乙醇，向Buffer YW中加入49 mL无水乙醇，混匀后使用。

操作步骤

1. 称取100-300 mg（推荐250 mg）的土壤样本至含有500 mg研磨珠（1 mm）的2 mL离心管中；

2. 向离心管中加入800 μL Buffer SA1、15 μL Proteinase K，涡旋振荡10 min；

3. 12,000 rpm室温离心5 min，吸取上清转移至一新的2 mL离心管中（上清中可能会存在碎屑，吸入少量不影响提取产物纯度）；

4. 向离心管加入0.25倍上清体积的Buffer SLB，涡旋混匀，冰浴5 min；

5. 12,000 rpm室温离心5 min，吸取上清转移至一新的2 mL离心管中，注意不要吸取到沉淀；

6. 向离心管中依次加入0.25倍上清体积Buffer SGB，0.75倍上清体积异丙醇（如上清体积600 μL，需先加入150 μL Buffer SGB再加入450 μL异丙醇），上下颠倒混匀；

7. 将上一步的混合液全部转入DNA Spin Column中（每次加入量不超过700 µL，若超过700 µL可分批加入），12,000 rpm室温离心1 min，弃滤液，将DNA Spin Column放入Collection tube中；

8. 向DNA Spin Column中加入600 μL Buffer SD，12,000 rpm室温离心1 min，弃滤液，将DNA Spin Column放入Collection tube中；

9. 向DNA Spin Column中加入600 μL Buffer YP（使用前请确认已添加无水乙醇），12,000 rpm室温离心1 min，弃滤液，将DNA Spin Column放入Collection tube中；

10. 向DNA Spin Column中加入600 μL YW（使用前请确认已添加无水乙醇），12,000 rpm室温离心1 min，弃滤液，将DNA Spin Column放入Collection tube中；

11. 重复步骤10；

12. 将DNA Spin Column重新置于Collection tube后，12,000 rpm室温离心2 min，取出DNA Spin Column置于新的1.5 mL离心管上；

13. 将DNA Spin Column开盖室温放置5-10 min，尽量使残留的乙醇挥发完全；

14. 向DNA Spin Column的膜中央悬空加入50-100 μL Buffer TE，室温静置2 min，12,000 rpm室温离心2 min，收集DNA溶液。若要得到更高浓度的DNA，也可以将第一次的洗脱液重新加回至DNA Spin Column中，室温静置2 min，12,000 rpm室温离心2 min，再次洗脱DNA。

注意事项

1. 部分试剂易挥发或氧化，应避免试剂长时间暴露于空气中，各试剂使用后应及时盖紧盖子。

2. 过量的DNA可能抑制YCR反应，建议将模板稀释后使用。

3. 操作时请穿实验服，并佩戴一次性手套。

4. 土壤DNA产量主要来源样品内微生物、植物动物残渣，冰冻或贮存过程中DNA会发生不同程度的降解导致DNA含量降低或条带成较严重的涂抹状（即降解）。建议尽量使用新鲜样品或贮存时间较短样品进行DNA提取，也可缩短涡旋时间，缓解DNA断链情况。

5. 如果土壤样品中的水分含量比较多，建议先将水分离心去除后再进行提取。

产品仅供科研用途，不用于临床诊断！

附操作流程简图

（产品包装升级中，以实物为准。）