产品信息

产品简介

本试剂盒利用超顺磁性磁珠高效吸附核酸的特性，再配合特别优化的缓冲体系，通过添加不同比例的分选液，可进行200 bp-1500 bp DNA片段的纯化与分选，整个操作过程简单、快捷，可对YCR体系、酶切体系的DNA纯化，通过分选获得的DNA片段可广泛应用于NGS（Next Generation Sequencing）文库构建。

储存与运输

冰袋（wet ice）运输，2-8℃储存；有效期12个月。

组成

使用前准备

1. 使用前请配制80%乙醇，最好现配现用。

2. 自备磁力架。

操作步骤

一、DNA片段纯化步骤

1. 提前将DNA片段分选液和Buffer TE从2-8℃取出，使其温度恢复至室温；

2. 上下颠倒DNA片段分选液，使磁珠分散均匀，向DNA样品中加入1.8倍体积的DNA片段分选液，用移液器轻轻吹打至磁珠分散均匀，室温静置5 min，期间使用移液器吹打混匀2-3次；

3. 将离心管置于磁力架上30 s，待上清清澈后，吸弃上清；

4. 加入200 µL 80%的乙醇，移开磁力架，使用移液器吹打至磁珠分散均匀，将离心管移至磁力架上静置30 s，待上清清澈后，吸弃上清；

5. 重复步骤4；

6. 将离心管盖打开，室温晾干5-10 min，使乙醇完全挥发（避免磁珠过度干燥，以免影响核酸得率）；

7. 移去磁力架，向离心管加入20-50 μL Buffer TE或Nuclease-free Water，使用移液器吹打至磁珠分散均匀，室温静置5 min；

8. 将离心管移至磁力架上至磁珠全部吸附至管壁，吸取上清至一新的离心管中，即得高纯度的DNA。

二、DNA片段分选步骤

1. 提前将DNA片段分选液从2-8℃取出，使其温度恢复至室温；

2. 第一次结合：上下颠倒DNA片段分选液，使磁珠分散均匀，根据需要得到的片段范围按照表1加入第一次片段分选液用量；

3. 用移液器轻轻吹打至磁珠分散均匀，室温静置5 min，期间使用移液器吹打混匀2-3次；

4. 将离心管置于磁力架上30 s，待上清清澈后，将上清转移至一新的离心管中；

备注：样本量×第一次分选液用量比例=分选液加入量，如100 µL样本×0.6=60 µL分选液；

5. 第二次结合：根据表1向上述离心管中加入0.1倍样体积的DNA片段分选液；

备注：样本量×第二次片段分选液用量比例=分选液加入量，如100 µL样本×0.1=10 µL分选液；

6. 用移液器轻轻吹打至磁珠分散均匀，室温静置5 min，期间使用移液器吹打混匀2-3次；

7. 将离心管置于磁力架上30 s，待上清清澈后，吸弃上清；

8. 加入200 µL 80%的乙醇，移开磁力架，使用移液器吹打混匀，将离心管移至磁力架上静置30 s，待上清清澈后，吸弃上清；

9. 重复步骤8；

10. 将离心管盖打开，室温晾干5-10 min，使乙醇完全挥发（避免磁珠过度干燥，以免影响核酸得率）；

11. 去掉磁力架，向离心管加入30-50 μL Buffer TE或Nuclease-free Water，使用移液器轻轻吹打至磁珠分散均匀，室温静置5 min；

12. 将离心管移至磁力架上至磁珠全部吸附至管壁，吸取上清至一新的离心管中，即得高纯度的DNA。

表1：DNA片段分选推荐分选液用量表

图1：DNA片段分选结果

注意事项

1. 操作之前，请务必认真阅读本产品说明书。

2. DNA片段分选样本量低于100 µL，可加水补至100 µL，样本量过少易使磁珠实际加入量不准，进而影响分选效果。

3. 磁珠易沉淀，使用前务必混匀。

4. 磁珠悬液在保存过程中避免冷冻。

5. 洗脱前，应使乙醇完全挥发，避免残留的乙醇影响下游实验。

6. 请勿长时间干燥磁珠，以免影响DNA洗脱效率。

7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！

附操作流程简图

（产品包装升级中，以实物为准。）