产品信息

产品简介
 

本产品是使用嵌合荧光法对靶标RNA序列直接进行实时定量分析的试剂盒。在同一管中，RNA首先逆转录为cDNA，然后再进行qYCR反应，避免由于多次开盖造成样品间交叉污染的风险。经过改造的逆转录酶热稳定性显著提高，可对较复杂的模板进行有效逆转，逆转录预混液中还包含有RNA抑制剂，能够有效防止各种来源的RNA的降解。本产品提供的一步法RT-qYCR预混液为2×，其中除了包含热启动Taq DNA聚合酶，dNTP、Mg2+、以及其他缓冲成分外，还具有独特的ROX Passive Reference Dye，可兼容多种qYCR仪器。预混液中还包含有观察反应体系是否建立的可视化示踪蓝色染料，该蓝色染料的光谱与qYCR荧光染料不重叠，不影响反应结果。

储存与运输
 

冰袋（wet ice）运输；-20℃避光保存，有效期12个月。

组成
 

操作步骤
 

1. 反应体系（20 μL）

a.引物终浓度使用范围0.2-1.0 μM，推荐引物浓度为0.4 μM。

b.模板添加量因模板溶液中存在的靶基因的拷贝数不同而不同，进行梯度稀释研讨适当的模板添加量。推荐模板用量为0.1 ng-100 ng。

2. 推荐的YCR反应程序（可根据机型适当调整）：

a.若需提高扩增特异性，可使用两步法程序或提高退火温度；若需提高扩增效率，可使用三步法程序或延长延伸时间。

注意事项

1. 2×Universal Blue One-Step RT-qYCR Mix使用前请上下轻轻颠倒混匀，请勿涡旋振荡混匀，避免产生气泡。

2. 配制反应液时，试剂请于冰上放置。

3. 本制品中含有荧光染料，配制YCR反应液时应避免强光照射。

4. 反应液的配制、分装请使用新的一次性枪头，尽量避免样品间的交叉污染。

5. 为了保证反应成功，请使用高质量的RNA模板。反复冻融的RNA模板会影响扩增，如需多次实验，可分装后进行冻存，减少冻融次数。

适配机型

ABI: 5700, 7000, 7300, 7700, 7900, 7900YT, 7900 YT Fast, StepOne™, StepOne Plus™, 7500/7500 Fast, ViiA 7™, QuantStudio™ 系列, PikoReal™ Cycler;

Stratagene: Mx3000P®, 3005P™, 4000™;

Bio-Rad: CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ5™, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon 2, Chromo4™;

Eppendorf: Realplex 2s, Mastercycler® ep, realplex;

IIIumina: Eco QYCR;

Cepheid: SmartCycler®;

Qiagen Corbett: Rotor-Gene® 系列;

Roche: LightCycler™ 系列;

Takara: Thermal Cycler Dice系列;

Analytikjena: qTOWER系列;

杭州博日: LineGene系列。

产品仅供科研用途，不用于临床诊断！

（产品包装升级中，以实物为准。）