产品信息

产品简介

本产品包括专门为第一链cDNA合成研发的5×即用型预混液(5×SweScript All-in-One SuperMix for qPCR)和gDNA Remover试剂，可在逆转反应进行的同时去除模板的基因组残留，另外配有5×SweScript All-in-One No-RT Control SuperMix，作为无逆转录酶的对照，判断qPCR模板是否来自cDNA。预混液包含有逆转录反应所需的所有试剂(SweScript RT, RNase Inhibitor, Random Primer, Oligo(dT)₁₈ Primer, dNTPs以及优化的缓冲体系)。SweScript RT是通过体外进化筛选获得的突变体逆转录酶，具有热稳定性高，持续合成能力强的特点。gDNA Remover中包含一种热敏感型DNase，比活是DNase I的30倍，且只作用于dsDNA，高温条件下易失活。

储存与运输

冰袋（wet ice）运输；-20℃保存，12个月有效期。

组成

操作步骤

1. 第一链cDNA合成与gDNA去除

(1) 反应体系配制（推荐20 μL反应体系）；

(2) 轻轻混匀并离心；

(3) 逆转录程序设置：

注意事项

1. 操作时请佩戴一次性手套，避免RNase污染。

2. 务必将5×SweScript All-in-One SuperMix、5×SweScript All-in-One No-RT Control SuperMix、gDNA Remover置于冰上。

3. 5×SweScript SuperMix、5×SweScript All-in-One No-RT Control SuperMix、gDNA Remover等含有高浓度甘油，使用前应短暂离心。

4. 针对高GC或复杂模板，可预先混合RNA模板、无核酸酶水并在65℃保温5 min后，迅速置冰上冷却。然后再加入其他反应组分。

5. 如需做阴性对照，只需将反应体系中的Y3348-1 5×SweScript All-in-One SuperMix for qPCR等体积替换成Y3348-4 5×SweScript All-in-One No-RT Control SuperMix for qPCR即可。

6. 逆转录产物可以-20℃短期保存，若需长期保存，建议分装后，于-80℃保存，避免反复冻融。

7. 如后续qPCR引物跨外显子设计，基因组去除步骤可省略。

产品仅供科研用途，不用于临床诊断！

（产品包装升级中，以实物为准。）