SweScript All-in-One Blue RT SuperMix for qPCR (One-Step gDNA Remover)
- 100 rxns
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 |
SweScript All-in-One Blue RT SuperMix for qPCR (One-Step gDNA Remover) | Y3340-50 | 50 rxns |
Y3340-100 | 100 rxns |
产品简介
本产品包括专门为第一链cDNA合成研发的5×即用型预混液（5×SweScript All-in-One Blue RT SuperMix for qPCR）和gDNA Remover试剂，可在逆转录反应进行的同时去除模板的基因组残留，另外配有5×SweScript All-in-One Blue No-RT Control SuperMix for qPCR，作为无逆转录酶的对照，判断qPCR模板是否来自cDNA。预混液包含有逆转录反应所需的所有试剂（SweScript RT, RNase Inhibitor, Random Primer, Oligo(dT)18 Primer, dNTPs以及优化的缓冲体系），同时包含有蓝色示踪染料，有助于减少加样错误，同时可为后续qPCR反应提供加样颜色指示及示踪。SweScript RT是通过体外进化筛选获得的突变体逆转录酶，具有热稳定性高，持续合成能力强的特点。gDNA Remover中包含一种热敏感型DNase，比活是DNase I的30倍，且只作用于dsDNA，高温条件下易失活。
储存与运输
冰袋（wet ice）运输；-20℃保存，12个月有效期。
组成
Component Number | Component | Y3340-50 | Y3340-100 |
Y3340-1 | 5×SweScript All-in-One Blue RT SuperMix for qPCR | 200 μL | 400 μL |
Y3340-2 | gDNA Remover | 50 μL | 100 μL |
Y3340-3 | Nuclease-free Water | 1 mL | 1 mL |
Y3340-4 | 5×SweScript All-in-One Blue No-RT Control SuperMix for qPCR | 20 μL | 40 μL |
说明书 | 1份 | ||
操作步骤
1. 第一链cDNA合成与gDNA去除
(1) 反应体系配制（推荐20 μL反应体系）；
Component | Volume |
5×SweScript All-in-One Blue RT SuperMix for qPCR | 4 μL |
gDNA Remover | 1 μL |
Total RNA/mRNA | 0.1 ng-5 μg/10 pg-0.5 μg |
Nuclease-free Water | Add to 20 μL |
(2) 轻轻混匀并离心；
(3) 逆转录程序设置：
Temperature | Time |
25℃ | 5 min |
42℃ | 15-30 min |
85℃ | 5 s |
注意事项
1. 操作时请佩戴一次性手套，避免RNase污染。
2. 务必将Y3340-1、Y3340-2、Y3340-4组份置于冰上。
3. Y3340-1、Y3340-2、Y3340-4组份等含有高浓度甘油，使用前应短暂离心。
4. 针对高GC或复杂模板，可预先混合RNA模板和无核酸酶水并在65℃保温5 min后，迅速置冰上冷却。然后再加入其他反应组分。
5. 如需做阴性对照，只需将反应体系中的Y3340-1组份等体积替换成Y3340-4组份即可。
6. 逆转录产物可以-20℃短期保存，若需长期保存，建议分装后，于-80℃保存，避免反复冻融。
7. 如后续qPCR引物跨外显子设计，基因组去除步骤可省略。
产品仅供科研用途，不用于临床诊断！
版本号：V1.0-202109
（产品包装升级中，以实物为准。）
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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