Taq U DNA Polymerase（for bisulfite-treated DNA）
- 50 rxns
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 |
Taq U DNA Polymerase（for bisulfite-treated DNA） | Y3357-50 | 50 rxns |
产品简介
本产品是专门扩增亚硫酸氢盐转化后含有尿嘧啶DNA的模板，用于基因组甲基化研究。本产品中包含有热启动Taq U DNA Polymerase能够对含有尿嘧啶的DNA模板进行读取，同时，在低温下由于抗体对DNA聚合酶的抑制作用，可有效降低引物的非特异退火；5×Taq U Reaction Buffer是针对经过转化后有损伤的DNA进行扩增的特别优化的缓冲体系，有效提高了扩增特异性与产量。
储存与运输
冰袋（wet ice）运输；-20℃保存；有效期12个月。
组成
Component Number | Component | Y3357-50 |
Y3357-1 | Taq U DNA Polymerase | 12.5 µL |
Y3357-2 | 5×Taq U Reaction Buffer | 1.25 mL |
Y3357-3 | 25 mM MgSO4 | 250 µL |
Y3357-4 | dNTPs (2.5 mM each) | 150 µL |
说明书 | 1份 | |
操作步骤
1. 反应体系（50 μL）
Component | Volume |
5×Taq U Reaction Buffer | 10 μL |
25 mM MgSO4 | 5 μL |
dNTPs (2.5 mM each) | 3 μL |
Forward Primer (10 μM)a | 2 μL |
Reverse Primer (10 μM)a | 2 μL |
Templateb | 50 ng-100 ng |
Taq U DNA Polymerase | 0.25 μL |
Nuclease-free Water | Add to 50 μL |
a：引物终浓度使用范围0.2-1.0 μM，推荐引物浓度为0.4 μM；无扩增产物或出现非特异性扩增时，可对MgSO4、dNTPs进行调整可改善扩增结果。
b：以亚硫酸氢盐转化（推荐Y3650 DNA亚硫酸氢盐转化试剂盒）的DNA为模板时，推荐使用50-100 ng每50 μL体系。
2. 推荐YCR反应程序：
Temperature | Time | Cycles |
95℃ | 10-15 s | 30-40 |
55-60℃ | 30 s | |
72℃ | 1 min/kb | |
72℃ | 5-10 min | 1 |
4℃ | Forever |
注意事项
1. 引物推荐使用专用引物设计程序设计，为确保能够很好地扩增亚硫酸氢盐转化后的DNA，建议设计引物时扩增片段不超过500 bp。
2. YCR反应的优化可以从Mg2+浓度、模板量、酶量、退火温度等方面进行调整。
3. 反复冻融的DNA模板会影响扩增，如需多次实验，可分装后进行冻存，减少冻融次数。
产品仅供科研用途，不用于临床诊断！
（产品包装升级中，以实物为准。）
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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