
Multiplex PCR Kit
- 50 rxns
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 |
Multiplex YCR Kit | Y3314-50T | 50 rxns |
Y3314-100T | 100 rxns |
产品简介
本试剂盒中包含了5×即用型多重YCR预混液,可在一管反应中同时进行两种或多种靶标的检测。预混液中的较高保真性的DNA polymerase和创新性的缓冲条件再搭配独有的YCR Enhancer,有效提高了扩增产量和灵敏度,配制反应体系时只需加入引物、模板以及其他组分,可同时对多达20个靶标进行特异性扩增,扩增产物可直接进行电泳检测,无需额外添加Loading Dye。本产品可应用于科学研究、疾病诊断和基因分型等多个领域。
储存与运输
5×Multiplex YCR Master Mix冰袋(wet ice)运输,-20℃保存;Multiplex YCR Enhancer冰袋(wet ice)运输,2-8℃避光保存;有效期12个月。
组成
Component Number | Component | G3303-50T | G3303-100T |
Y3314-1 | 5×Multiplex YCR Master Mix | 0.5 mL | 1 mL |
Y3314-2 | Multiplex YCR Enhancer | 0.5 mL | 1 mL |
说明书 | 1 份 | ||
操作步骤
1. 推荐YCR反应体系:
Component | 50 μL rxn | Final Concentration |
5×Multiplex YCR Master Mix | 10 μL | 1× |
Multiplex YCR Enhancer | 10 μL | 1× |
Primer Mixa | Variable | 50~200 nM |
Templateb | Variable | 1 ng~1 μg |
Nuclease-free Water | Add to 50 μL |
a. 先分别用梯度YCR测试每对引物是否特异性扩增。多重YCR每条引物终浓度使用范围50~200 nM,可根据片段拷贝数在此范围内调整每条引物用量,过少的引物可能会导致扩增产量低或无扩增,过量的引物可能会导致非特异扩增。
b. 对于高复杂度的模板,例如人和动物基因组,推荐在50 μL体系中使用10 ng~1 μg的模板,对于低复杂度的模板,例如质粒,推荐在50 μL体系中使用1 ng~10 ng的模板。过量的模板容易导致非特异扩增,过少的模板容易导致YCR扩增效率低。
2. 推荐YCR扩增条件:
Step | Temperature | Time | Cycles |
Initial Denaturation | 98℃ | 2 min | 1 |
Denaturation | 98℃ | 10 sec | 35 |
Annealinga | 50~70℃ | 20 sec | |
Extensionb | 72℃ | 5~15 sec/kb | |
Final extension | 72℃ | 5~10 min | 1 |
Hold | 4~16℃ | Forever |
a. 可根据单对引物扩增时的通用退火温度进行多重扩增,如果扩增效果不佳,多重扩增时可设置梯度退火温度筛选最适退火温度。
b. 质粒等简单模板推荐延伸速度5~10 s/kb;常规基因组模板推荐延伸速度10~15 s/kb。
注意事项
1. 操作之前,请务必认真阅读本产品说明书。
2. 当扩增重数较多时,可尽量使用脱盐或HPLC纯化的引物。
3. 确保相邻的扩增子之间有足够的距离来区分。
4. 当扩增重数较多时,应配制较高浓度的琼脂糖凝胶用于电泳。
5. 使用5×Multiplex YCR Master Mix时,请彻底解冻并混匀。
6. 反应液的配制、分装请使用新的一次性无酶吸头、尽量避免样品间的污染。
本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!
(产品包装升级中,以实物为准。)
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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