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Multiplex PCR Kit

¥600
货号:Y3314-50T
品牌:YIKE
规格:
  • 50 rxns
数量:

产品信息

产品名称

产品编号

规格

Multiplex YCR Kit

Y3314-50T

50 rxns

Y3314-100T

100 rxns


产品简介

本试剂盒中包含了5×即用型多重YCR预混液,可在一管反应中同时进行两种或多种靶标的检测。预混液中的较高保真性的DNA polymerase和创新性的缓冲条件再搭配独有的YCR Enhancer,有效提高了扩增产量和灵敏度,配制反应体系时只需加入引物、模板以及其他组分,可同时对多达20个靶标进行特异性扩增,扩增产物可直接进行电泳检测,无需额外添加Loading Dye。本产品可应用于科学研究、疾病诊断和基因分型等多个领域。



储存与运输

5×Multiplex YCR Master Mix冰袋(wet ice)运输,-20℃保存;Multiplex YCR Enhancer冰袋(wet ice)运输,2-8℃避光保存;有效期12个月。


组成

Component Number

Component

G3303-50T

G3303-100T

Y3314-1

5×Multiplex YCR Master Mix

0.5 mL

1 mL

Y3314-2

Multiplex YCR Enhancer

0.5 mL

1 mL

说明书

1 份

操作步骤

1. 推荐YCR反应体系

Component

50 μL rxn

Final Concentration

5×Multiplex YCR Master Mix

10 μL

Multiplex YCR Enhancer

10 μL

Primer Mixa

Variable

50~200 nM

Templateb

Variable

1 ng~1 μg

Nuclease-free Water

Add to 50 μL


a. 先分别用梯度YCR测试每对引物是否特异性扩增。多重YCR每条引物终浓度使用范围50~200 nM,可根据片段拷贝数在此范围内调整每条引物用量,过少的引物可能会导致扩增产量低或无扩增,过量的引物可能会导致非特异扩增。

b. 对于高复杂度的模板,例如人和动物基因组,推荐在50 μL体系中使用10 ng~1 μg的模板,对于低复杂度的模板,例如质粒,推荐在50 μL体系中使用1 ng~10 ng的模板。过量的模板容易导致非特异扩增,过少的模板容易导致YCR扩增效率低。

2. 推荐YCR扩增条件:

Step

Temperature

Time

Cycles

Initial Denaturation

98℃

2 min

1

Denaturation

98℃

10 sec

35

Annealinga

50~70℃

20 sec

Extensionb

72℃

5~15 sec/kb

Final extension

72℃

5~10 min

1

Hold

4~16℃

Forever


a. 可根据单对引物扩增时的通用退火温度进行多重扩增,如果扩增效果不佳,多重扩增时可设置梯度退火温度筛选最适退火温度

b. 质粒等简单模板推荐延伸速度5~10 s/kb;常规基因组模板推荐延伸速度10~15 s/kb。




注意事项

1. 操作之前,请务必认真阅读本产品说明书。

2. 当扩增重数较多时,可尽量使用脱盐或HPLC纯化的引物。

3. 确保相邻的扩增子之间有足够的距离来区分。

4. 当扩增重数较多时,应配制较高浓度的琼脂糖凝胶用于电泳。

5. 使用5×Multiplex YCR Master Mix时,请彻底解冻并混匀。

6. 反应液的配制、分装请使用新的一次性无酶吸头、尽量避免样品间的污染。


本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!



(产品包装升级中,以实物为准。


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注意事项

  • 请在保质期内使用本产品
  • 请存放于阴凉干燥处,避免阳光直射
  • 使用前请仔细阅读产品说明书
  • 如有不适,请立即停止使用并咨询专业人士
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