产品信息

产品简介

本试剂盒包含小鼠尾巴、脚趾、耳朵快速裂解缓冲液和用于基因分型的YCR Mix，裂解产物无需进行基因组提取纯化，可直接作为模板用于YCR扩增，操作简便，对小鼠损伤小，只需要微量的组织样本即可达到高效的基因分型、基因敲除检测、转基因鉴定等。

本产品配套的2×Mouse Genotyping YCR Mix (+Dye)包含了高抗抑制性能和快速扩增的DNA Polymerase、dNTPs以及优化的缓冲体系，具有直接扩增效率高和特异性强的特点，适用于2 kb以内的目的基因扩增。

储存与运输

冰袋（wet ice）运输；Mouse Genotyping Lysis Buffer A，4℃保存；其余组分-20℃保存；有效期12个月。

组成

操作步骤

1. 模板制备

a) 裂解液配制：

a. Mouse Genotyping Lysis Buffer A在低温条件下有白色沉淀析出，使用前37℃孵育2-3 min至白色沉淀消失，不影响使用。

b) 轻轻混匀，并瞬时离心；

c) 取1-3 mm的小鼠尾尖、2-3 mm直径（打孔）小鼠耳朵或2-3 mm脚趾（不含指甲的长度），将单样本裂解液加入到需裂解的样本中，50℃孵育10 min，95℃孵育3 min进行充分裂解；

d) 12,000 rpm离心1 min，将裂解后的组织块离心至管底，上清可直接作为YCR反应模板。可将上清转移至另一无菌YP，置于-20℃长期保存。

2. 推荐YCR反应体系：

a. 模板用量不应超过反应体系的1/10。

b. 引物终浓度使用范围0.5-1.0 μM，推荐引物浓度为0.5 μM，过少的引物可能会导致扩增产量低或无扩增，过量的引物可能会导致非特异扩增。

3. 推荐YCR扩增条件：

注意事项

1. 试剂使用前请上下轻轻颠倒混匀，请勿涡旋振荡混匀，避免产生气泡。

2. 每次取样后将取样器侵入2%次氯酸钠溶液中反复冲洗，避免产生不同样本间的交叉污染。

3. 组织应尽量剪碎，以便裂解充分。

4. Mouse Genotyping Lysis Buffer A与Mouse Genotyping Lysis Buffer B应现配现用，混合后不宜放置太长时间，否则会影响裂解效果。

5. 组织块如果难以裂解，可将50℃裂解时间延长至20 min。

6. 裂解完成后，YP管中残存有未完全裂解的组织块，属于正常现象，不影响使用。

产品仅供科研用途，不用于临床诊断！

（产品包装升级中，以实物为准。）