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普通ECL化学发光试剂盒(纳克级)

¥240
货号:Y2025-100ML
品牌:YIKE
规格:
  • 50 mL×2
数量:

 

 

产品信息

产品名称产品编号规格
普通ECL化学发光试剂盒(纳克级)Y2025-100ML2×50 mL
Y2025-500ML2×250 mL

 

产品简介
 

本产品是一种灵敏度较高的化学发光试剂盒,基本原理是以luminol为基础的化学发光;可与二抗上偶联的辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)发生反应而发光,通过X-光胶片曝光或其他成像方法(如荧光或化学发光成像仪)进行检测;检测极限为纳克级,可满足大部分目的蛋白的曝光实验需求。

 

储存与运输
 

冰袋(wet ice)运输;2-8℃避光保存,有效期12个月。

 

组成
 

Component NumberComponentG2014-100MLG2014-500ML
Y2025-1普通ECL A液50 mL250 mL
Y2025-2普通ECL B液50 mL250 mL
说明书1份

 

操作步骤

1. 将ECL A液和ECL B液等体积混合制成ECL工作液,室温配制,现配现用;

2. Western Blot实验中PVDF膜(或NC膜)经二抗孵育后,多次洗涤,滤纸吸去多余液体;将膜放在两片洁净保鲜膜(或PE手套)中间,加入ECL工作液覆盖膜表面,此过程应小心完成,避免膜与膜之间产生气泡;

3. 充分反应之后,用滤纸或吸水纸吸去多余的ECL工作液,随后进行压片检测或是荧光成像仪检测;

4. 压完的胶片用显影、定影试剂(推荐Y2030Y2034Y2035)进行显影和定影(若为荧光成像仪曝光忽略此步骤);根据发光强度调整曝光条件。

 

注意事项
 

1. ECL A液和B液吸液过程中务必更换枪头,避免A液、B液交叉污染,致使活性成分失效。

2. 在与膜发生接触过程中,请佩戴手套且使用干净镊子等洁净器材,避免外源蛋白质及金属离子污染。

3. 叠氮化钠会抑制HRP的活性,所有相关试剂应避免使用。

4. ECL工作液配置完成后请于一天内使用完,请勿留置到第二天,以免影响实验结果的准确性。

5. 各溶液使用后,请盖紧瓶盖避光保存,以防失效;特别是B液,含有氧化剂,容易被还原而失效。

6. ECL化学发光试剂盒选择参照附表一,一抗及二抗推荐稀释比测试数据均来自自研抗体。

7. ECL化学发光检测常见问题及解决方案参照附表二。

8. ECL化学发光试剂盒A/B液均对人体有害,操作时务必小心,注意有效防护,避免直接接触人体或吸入呼吸道。

9. 本产品低温可能析出结晶沉淀,充分解冻涡旋促进溶解,混匀,可继续使用。

10. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

附表一:ECL化学发光试剂盒选择参照表

产品名称普通ECL化学发光试剂盒灵敏ECL化学发光试剂盒超敏ECL化学发光试剂盒
目录号Y2025Y2085Y2031
检测极限纳克级皮克级飞克级
一抗推荐稀释比(1 mg/mL储存液)1:1000-1:50001:4000-1:100001:10000-30000
二抗推荐稀释比(1 mg/mL储存液)1:1000-1:60001:3000-1:600001:6000-150000
特点及适用性宽范围,适用性广宽范围,适用性广,灵敏度高,中丰度蛋白,节省抗体极高灵敏度,低丰度蛋白,抗体效价低或比较珍贵

附表二:ECL化学发光检测常见问题及解决方案
 

常见问题可能原因解决方法
高背景(背景较高或无特异性条带)一抗、二抗稀释没有使用正确的缓冲液和浓度适当降低稀释比,降低一抗、二抗的浓度
封闭液使用不正确或封闭不充分磷酸化蛋白检测务必使用BSA或无蛋白封闭液封闭;膜孔径越小,封闭及洗脱时间应越长
一抗孵育不充分适当延长孵育时间(4℃孵育过夜)
信号弱一抗、二抗使用浓度偏低提高一抗、二抗使用浓度
蛋白丰度低增加上样体积
换用灵敏度更高的ECL化学发光试剂盒
荧光迅速猝灭,出现空心条带(鬼带)目的条带荧光过强,快速消耗发光底物,底物消耗完之后就会出现反白的情况降低蛋白上样量或一抗、二抗的用量
膜上出现棕色或黄色条带目标区域HRP酶含量过于丰富,产生大量自由基,致使HRP酶氧化失活降低蛋白上样量或一抗、二抗的用量



 

本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!
 

 


 

(产品包装升级中,以实物为准。)


 

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注意事项

  • 请在保质期内使用本产品
  • 请存放于阴凉干燥处,避免阳光直射
  • 使用前请仔细阅读产品说明书
  • 如有不适,请立即停止使用并咨询专业人士
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