产品信息

产品简介

本产品提供了简单而快速的PAGE彩色凝胶配制方法，能够快速制备下层胶（分离胶）和上层胶（浓缩胶）。本试剂盒包含两种上层胶染料（红色/绿色），可用于制备不同颜色的上层胶。该染料可在上层胶中稳定存在，不影响电泳或Western Blot等应用。本产品制备的凝胶可用于非变性PAGE凝胶电泳。本产品可制备常规尺寸的凝胶50块，具体配制的凝胶块数量与凝胶的厚薄及大小有关。

本手册适用于彩色凝胶超快速配制试剂盒系列产品（Y2052，Y2053，Y2054，Y2055，Y2056）。

系列产品货号

产品特点：

1. 点样孔清晰可见，极大提高上样效率

2. 制胶方便快捷，无需计算

3. 无需额外添加TEMED，避免异味

4. 凝胶无SDS成分，可以兼容非变性PAGE凝胶电泳

储存与运输

冰袋（wet ice）运输；改良型促凝剂-20℃保存，开封后于2-8℃保存，有效期3个月；其他2-8℃避光保存，有效期12个月。

组成

操作步骤

1. 根据目的蛋白分子量大小选择合适浓度的PAGE下层胶（分离胶），参照表格如下（2-8kDa大小蛋白建议使用Y2170，低分子量蛋白分离、Tricine体系）：

2. 按照以下步骤进行制胶。具体试剂用量以及不同厚度的玻璃板所需凝胶液体积，参考下方表格。

2.1. 取等体积下层胶溶液A和下层胶溶液B，并加入适量改良型促凝剂，混匀。装配好凝胶制具，先加入配制好的下层胶溶液，然后使用蒸馏水或乙醇等溶液封住下层胶液面。

2.2. 待下层胶凝固充分（约15-30 min）后，弃去水或者乙醇，并用滤纸吸干残留的水或者乙醇。

2.3. 取等体积的上层胶溶液A和上层胶溶液B，准确吸取上层胶彩色染料加入凝胶液混匀，加入适量改良型促凝剂，混匀。上层胶染料容易沉降，使用前需充分混匀。上层胶染料也可不加，则所得凝胶上层为无色。加入配制好的上层胶溶液，插入梳子，待其凝固（约15-30 min）后即可使用。

备注：也可以事先将红色或者绿色100 μL染料全部加入上层胶溶液B中预混使用。

3. 配制完成的凝胶如不能当天使用，可2-8℃保存1-2天。

推荐电泳条件：

使用YWE快速高分辨电泳缓冲液（Y2092）进行电泳：200-250 V，25-35 min；

或使用Tris-Glycine电泳缓冲液（Y2029）进行电泳：上层胶90 V，约30 min（marker进入分离胶）

下层胶150-180 V，约60-90 min(可根据实际情况调整)。

注意事项

1. 温差过大制胶过程产热可能会产生气泡，建议将A、B预混液配好后恢复至室温，再加改良型促凝剂。

2. 改良型促凝剂相较于过硫酸铵（AP）稳定性更好，使用时拿出一支，使用结束后于2-8℃保存，以便后续常规使用，可保存三个月；若长期不用请放置于-20℃保存，避免反复冻融。

3. 预混液中存在单体丙烯酰胺，对人体有害，操作时请注意做好防护措施。

4. 加入改良型促凝剂之后尽快灌制凝胶，请勿长时间放置。

5. 温度对于胶的凝固时间影响较大，一般温度越低，凝固时间越长，适当增加改良型促凝剂；温度越高凝胶越快，适当减少改良型促凝剂。建议温度较低的情况下（15℃含以下）促凝剂添加量加倍。

6. 如需进一步加快凝胶速度，临配胶前可按需补充适量TEMED，同时增加0.5倍改良型促凝剂使用量。

7. 如溶液A出现结晶或凝固，不可继续使用。

8. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

产品仅供科研用途，不用于临床诊断！

（产品包装升级中，以实物为准。）