6% PAGE彩色凝胶超快速配制试剂盒
- 50 T
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 |
PAGE彩色凝胶超快速配制试剂盒 | Y2052-50T | 50 T |
Y2053-50T | 50 T | |
Y2054-50T | 50 T | |
Y2055-50T | 50 T | |
Y2056-50T | 50 T |
产品简介
本产品提供了简单而快速的PAGE彩色凝胶配制方法，能够快速制备下层胶（分离胶）和上层胶（浓缩胶）。本试剂盒包含两种上层胶染料（红色/绿色），可用于制备不同颜色的上层胶。该染料可在上层胶中稳定存在，不影响电泳或Western Blot等应用。本产品制备的凝胶可用于非变性PAGE凝胶电泳。本产品可制备常规尺寸的凝胶50块，具体配制的凝胶块数量与凝胶的厚薄及大小有关。
本手册适用于彩色凝胶超快速配制试剂盒系列产品（Y2052，Y2053，Y2054，Y2055，Y2056）。
系列产品货号
货号 | 凝胶浓度 | 可制胶数量（大约） |
Y2052-50T | 6% | 60块0.75 mm胶， 或50块1.0 mm胶， 或30块1.5 mm胶 |
Y2053-50T | 8% | |
Y2054-50T | 10% | |
Y2055-50T | 12% | |
Y2056-50T | 15% |
产品特点：
1. 点样孔清晰可见，极大提高上样效率
2. 制胶方便快捷，无需计算
3. 无需额外添加TEMED，避免异味
4. 凝胶无SDS成分，可以兼容非变性PAGE凝胶电泳
储存与运输
冰袋（wet ice）运输；改良型促凝剂-20℃保存，开封后于2-8℃保存，有效期3个月；其他2-8℃避光保存，有效期12个月。
组成
组分名称 | 规格 |
上层胶溶液A | 50 mL |
上层胶溶液B | 50 mL |
下层胶溶液A | 125 mL |
下层胶溶液B | 125 mL |
聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)上层胶红色染料(500×) | 100 μL |
聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)上层胶绿色染料(500×) | 100 μL |
改良型促凝剂 | 1 mL×5 |
说明书 | 1份 |
操作步骤
1. 根据目的蛋白分子量大小选择合适浓度的PAGE下层胶（分离胶），参照表格如下（2-8kDa大小蛋白建议使用Y2170，低分子量蛋白分离、Tricine体系）：
PAGE分离胶浓度 | 最佳分离范围（kDa） （Tris-Glycine普通电泳缓冲液，Y2029） | 最佳分离范围（kDa） （YWE快速高分辨电泳缓冲液，Y2092） |
6% | 50-300 | 15-300 |
8% | 30-130 | 10-250 |
10% | 20-100 | 10-150 |
12% | 10-60 | 8-100 |
15% | <40 | <60 |
2. 按照以下步骤进行制胶。具体试剂用量以及不同厚度的玻璃板所需凝胶液体积，参考下方表格。
2.1. 取等体积下层胶溶液A和下层胶溶液B，并加入适量改良型促凝剂，混匀。装配好凝胶制具，先加入配制好的下层胶溶液，然后使用蒸馏水或乙醇等溶液封住下层胶液面。
2.2. 待下层胶凝固充分（约15-30 min）后，弃去水或者乙醇，并用滤纸吸干残留的水或者乙醇。
2.3. 取等体积的上层胶溶液A和上层胶溶液B，准确吸取上层胶彩色染料加入凝胶液混匀，加入适量改良型促凝剂，混匀。上层胶染料容易沉降，使用前需充分混匀。上层胶染料也可不加，则所得凝胶上层为无色。加入配制好的上层胶溶液，插入梳子，待其凝固（约15-30 min）后即可使用。
备注：也可以事先将红色或者绿色100 μL染料全部加入上层胶溶液B中预混使用。
配制组别 | 组分 | 0.75 mm玻璃板 | 1.0 mm玻璃板 | 1.5 mm玻璃板 |
下层胶溶液 | 下层胶溶液A | 2 mL | 2.5 mL | 4 mL |
下层胶溶液B | 2 mL | 2.5 mL | 4 mL | |
改良型促凝剂 | 24 μL | 30 μL | 48 μL | |
上层胶溶液 | 上层胶溶液A | 1 mL | 1 mL | 1.5 mL |
上层胶溶液B | 1 mL | 1 mL | 1.5 mL | |
改良型促凝剂 | 12 μL | 12 μL | 18 μL | |
上层胶红色/绿色染料(500×) | 4 μL | 4 μL | 6 μL |
3. 配制完成的凝胶如不能当天使用，可2-8℃保存1-2天。
推荐电泳条件：
使用YWE快速高分辨电泳缓冲液（Y2092）进行电泳：200-250 V，25-35 min；
或使用Tris-Glycine电泳缓冲液（Y2029）进行电泳：上层胶90 V，约30 min（marker进入分离胶）
下层胶150-180 V，约60-90 min(可根据实际情况调整)。
注意事项
1. 温差过大制胶过程产热可能会产生气泡，建议将A、B预混液配好后恢复至室温，再加改良型促凝剂。
2. 改良型促凝剂相较于过硫酸铵（AP）稳定性更好，使用时拿出一支，使用结束后于2-8℃保存，以便后续常规使用，可保存三个月；若长期不用请放置于-20℃保存，避免反复冻融。
3. 预混液中存在单体丙烯酰胺，对人体有害，操作时请注意做好防护措施。
4. 加入改良型促凝剂之后尽快灌制凝胶，请勿长时间放置。
5. 温度对于胶的凝固时间影响较大，一般温度越低，凝固时间越长，适当增加改良型促凝剂；温度越高凝胶越快，适当减少改良型促凝剂。建议温度较低的情况下（15℃含以下）促凝剂添加量加倍。
6. 如需进一步加快凝胶速度，临配胶前可按需补充适量TEMED，同时增加0.5倍改良型促凝剂使用量。
7. 如溶液A出现结晶或凝固，不可继续使用。
8. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品仅供科研用途，不用于临床诊断！
（产品包装升级中，以实物为准。）
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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