产品简介

一科SwePAGE预制胶是即开即用型的小型聚丙烯酰胺凝胶，使用方便快捷。SwePAGE预制胶胶板设计独特，经特殊表面处理，可以提高蛋白条带分辨率，使条带分布更均匀。该预制胶为Bis-Tris凝胶缓冲体系，比常规的Tris-Glycine具有更强的缓冲能力，拥有更高的分辨率，蛋白条带更加锐利清晰。可配套使用Tris-MOPS SDS-PAGE Running Buffer、Tris-MES SDS-PAGE Running Buffer等电泳缓冲液。本产品中搭配Tris-MOPS SDS-PAGE Running Buffer（Powder）（Y2062）；本产品不含SDS，可用于非变性电泳，依赖于采用合适的电泳缓冲液和相应试剂。与传统实验室自配凝胶相比较，SwePAGE预制胶具有以下优点：

简单易用：即开即用，无需自配，无需接触单体丙烯酰胺等有毒试剂

上样量大：最大上样量可达80 μL

高分辨率：凝胶配方优化于Bis-Tris体系，拥有更高的分辨率，蛋白条带更加锐利

稳定性更优：弱酸性凝胶缓冲液（pH 6.5），能大大减少丙烯酰胺的降解，提高凝胶稳定性

兼容性更佳：兼容大多数小型蛋白凝胶垂直电泳槽（如servicebio、六一、Bio-Rad、天能等）

SwePAGE预制胶胶板尺寸：宽100 mm，高82 mm；凝胶尺寸：宽85 mm，高60 mm，厚度1.0 mm。提供不同浓度的固定浓度胶，包括8%、10%和12%，可用于不同分子量蛋白的分离；同时提供3个梯度胶，包括4-20%、4-12%、8-16%，满足不同区间分子量蛋白的分离。每种浓度的预制胶都有11个点样孔、13个点样孔、16个点样孔等三种规格，除去marker泳道之外，方便进行不同分组的三重复样本同时电泳，满足客户上样量大的需求。具体见相关产品信息部分。

储存与运输

冰袋（wet ice）运输；2-8℃保存，有效期18个月。

SwePAGE预制胶使用步骤

1. 将试剂盒中提供的电泳缓冲液（Tris-MOPS SDS-PAGE Running Buffer（Powder），产品货号Y2062），用纯水溶解并定容至1 L备用。将SwePAGE预制胶从包装袋中取出，撕掉胶板底部的胶带，见图1。

图 1撕下胶板底部胶带

2. 将梳子从胶板中慢慢推出，注意两边推力尽量保持一致，见图2；将胶板放入凝胶电泳装置中。

图 2将梳子从胶板中推出

3. 预制胶电泳前准备工作：以servicebio垂直电泳仪（YVE-2）为例，均带有两款密封硅胶条，凸起款（图3A）和平直款（图3D），原装一般为凸起款，该类密封硅胶条顶部有突起结构，而SwePAGE预制胶其短板是凹形结构且该部位是平直的，因此电泳前需将电泳槽中具有突起结构的密封硅胶条取出反装，平直面朝外或直接换成平直款，防止电泳漏液。具体操作如下：将电泳槽中的U型密封条取出（图3A、B），反装胶条，平直面朝外（图3C）或换成平直款（图3D）重新插回框架内的凹槽，见图3；如使用六一品牌电泳槽以上步骤可忽略；完成以上步骤后将预制胶板放入凝胶电泳装置中。

图 3电泳仪反装胶条，换胶条

注：塑料板装载的时候矮边沿一面朝内，若只进行单块预制胶电泳，另一边请插入挡板，以防电泳液漏液；此处以自研电泳仪凸起款密封胶条为例，如无凸面忽略此步骤。

4. 向电泳槽的内槽中倒入足量的1×MOPS或1×MES电泳缓冲液使其覆盖上样孔5-7 mm，在外槽中加入相同的电泳缓冲液以确保适当的冷却。为了获得最好的效果，外槽的缓冲液需要加到比内槽液面稍低的位置，但不可漫过胶板（注意：MOPS及MES电泳缓冲液的选择，MES更适合于较小蛋白的分离。Tris-Glycine电泳缓冲液与SwePAGE预制胶的Bis-Tris凝胶体系不兼容，不可使用Tris-Glycine电泳缓冲液）。

5. 使用注射器或吸头吸取适量电泳缓冲液，将上样孔轻轻冲洗干净，去除孔内气泡和残留的液体。

6. 样本准备

（1）SDS-PAGE凝胶电泳：蛋白样本与5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液（推荐Y2024, Y2086）按照4:1体积比混匀，然后通过金属浴或沸水浴保持100℃保温3-5min，即可用于电泳点样。推荐蛋白上样总量是50-200 μg。

（2）非变性PAGE电泳：蛋白样本与不含SDS的5×蛋白上样缓冲液（推荐Y2045），按照4:1体积比混匀，不要加热，混匀后即可用于电泳点样。注意：SwePAGE预制胶的pH为6.5，呈弱酸性，不含SDS，可用于酸性蛋白（PI<6.5）的非变性电泳，但不能用于碱性蛋白的非变性电泳。此外，预制胶套盒内提供的电泳缓冲液含有SDS，不适合非变性电泳。

7. 点样及电泳：点样时吸头的尖端保持垂直插入到上样孔中，吸头不要戳破胶体或者使胶板变形，否则会导致样品漏孔。完成点样后，将电泳槽盖子盖好，将电源线插头插入到电泳仪电源插孔（红对红，黑对黑），在200 V电压下电泳25-45 min，直至溴酚蓝条带移动到凝胶底部。注意：凝胶的电泳电压请根据实际情况作出相应调整，部分电泳仪底部散热较差，过高的电压导致局部温度过高，影响电泳效果，这时需适当降低电压并冰浴。下表数据可供参考。

8. 电泳完成后从电泳槽中取出预制胶，通过撬具小心插入到胶板之间的缝隙（见图4红色框），从上到下依次轻轻撬开塑料板，直至完全撬开；凝胶可能粘连在胶板的任意一侧，将无凝胶的胶板取下，有凝胶的胶板上有胶一侧浸入水中，胶板倾斜轻轻提起，凝胶掉入水中后，将凝胶从水中取出进行染色或者后续转膜操作。注意：使用后的胶板及梳子按照医疗垃圾或实验废弃物处置，不可投入生活垃圾桶。
 

图 4撬开胶板(撬一侧为例，另一侧重复此步骤)

相关产品信息

仅供科研用途，不可用于临床诊断！