产品信息

产品描述
 

Dihydroethidium，简称DHE，是一种常用的超氧化物阴离子荧光检测探针。DHE可以自由的进入细胞，在细胞内超氧化物阴离子作用下脱氢，从而生成溴化乙锭。溴化乙锭可以与细胞内核酸结合，产生红色荧光。当细胞内超氧化物阴离子含量较高时，产生的溴化乙锭越多，荧光强度越高，反之荧光强度越弱。因此可以用其对细胞内超氧化物阴离子水平进行检测。

储存与运输
 

干冰(dry ice)运输；-20℃避光保存，6个月有效。

试剂盒组成
 

注意：上述反应次数为6孔板体系检测。
 

操作步骤

1. 本产品为5 mM Dihydroethidium (超氧化物阴离子荧光探针)母液，将其使用对应的培养基或缓冲液（PBS等）稀释成DHE检测工作液（通常1-10 μM可以满足实验所需）。

2. 将正常或处理过的细胞，使用PBS或其他缓冲液洗涤1-2次。

3. 移除洗涤缓冲液后，加入1mL DHE检测工作液，于细胞培养箱中避光孵育30 min。

4. 去除DHE检测工作液，使用PBS或其他缓冲液洗涤1-2次。

5. 于对应的仪器下进行检测：DHE本身为蓝色荧光，Ex为355 nm，Em为420 nm；当DHE脱氢和核酸结合后显示为红色荧光，Ex为520 nM，Em为605 nM。

注意事项
 

1. 由于细胞的种类和性质不同，探针工作浓度以及孵化的时间，可根据实验需要进行适当调整。

2. 探针检测工作液、洗涤缓冲液等需要提前预热处理，以免温差刺激影响细胞。

3. 荧光染料存在淬灭问题，操作过程需注意避光。

4. Dihydroethidium在空气中容易氧化，尽量避免暴露于空气中，建议分装成小份保存，避免反复冻融。

5. 本产品仅用于科研，不适用于临床诊断或治疗以及其他。

本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！