产品信息

产品描述
 

Lyso-Tracker Red DND-99是一种进行了荧光标记的带有弱碱性的红色荧光探针，可以选择性地滞留在偏酸性的溶酶体中，从而实现对于溶酶体的特异性荧光标记。Lyso-Tracker Red DND-99 的最大激发和发射波长为 577/590 nm，可使用 TRITC 滤光片有效激发。

储存与运输
 

干冰(dry ice)运输；-20℃避光保存，6个月有效。

试剂盒组成

操作步骤

1 检测工作液配制：

1.1 本产品为1 mM存储液，实验前融化至室温，短暂低速离心，确保试剂沉置管底；

1.2 推荐使用不含血清的培养基（也可使用Hanks、PBS等）将探针稀释成50-75 nM的溶酶体检测工作液（经测试，50 nM足以对细胞进行染色）；

2 细胞染色（以下为贴壁细胞方案，悬浮细胞换液需要离心操作）：

2.1 正常或处理过后的细胞，用不含血清的培养基洗涤2-3次；

2.2 加入预热的溶酶体检测工作液，37℃避光孵育30 min（不同细胞可以调整检测液的浓度和孵育时间）；

2.3 去除探针，不含血清的培养基洗涤2-3次；

3 镜检：荧光显微镜下观察，选择DsRed通道即可激发。

注意事项
 

1. Lyso-Tracker Red DND-99探针的内吞作用动力学研究显示染料进入活细胞的摄入时间仅几秒即可。然而，这些溶酶体探针会导致溶酶体被碱化，长期孵育会诱使溶酶体pH值的增加。因此，建议成像前用探针孵育细胞的时间不能太久。

2. 该染料适用于活细胞，不可固定后染色，染色后可用戊二醛进行固定，但会稍微降低荧光强度。

3. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

4. 首次使用探针建议分装后使用，避免反复冻融。

5. 为了您的健康和安全，操作时请穿好实验服、戴好手套。

本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！